附件：革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2023年第22號(hào)）.doc

革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門(mén)審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊(cè)申請(qǐng)人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評(píng)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿(mǎn)足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系不斷完善及科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于利用生化鑒定原理，鑒定臨床醫(yī)學(xué)相關(guān)的革蘭陽(yáng)性需氧型、厭氧型或兼性厭氧細(xì)菌的試劑（革蘭陽(yáng)性菌及其鑒定簡(jiǎn)介見(jiàn)附件）；檢測(cè)樣本為從血液、體液、糞便、泌尿生殖道分泌物等臨床樣本中分離的純菌。

對(duì)于其他方法，可能部分要求不適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請(qǐng)人可以根據(jù)產(chǎn)品特性對(duì)適用部分進(jìn)行評(píng)價(jià)或補(bǔ)充其他的評(píng)價(jià)資料進(jìn)行相應(yīng)性能的驗(yàn)證，但需闡述不適用的理由，并說(shuō)明替代方法的科學(xué)合理性。

二、注冊(cè)審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱(chēng)及分類(lèi)編碼

產(chǎn)品名稱(chēng)應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求。根據(jù)《體外診斷試劑分類(lèi)子目錄》，該產(chǎn)品按照第二類(lèi)體外診斷試劑管理，分類(lèi)編碼為6840。

2.其他資料包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史以及其他需要說(shuō)明的內(nèi)容。

1.概述

1.1通用名稱(chēng)及確定依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》要求，體外診斷試劑的產(chǎn)品名稱(chēng)一般由被測(cè)物質(zhì)名稱(chēng)、用途和方法/原理三部分組成，例如：本產(chǎn)品被測(cè)物為革蘭陽(yáng)性菌，用途為鑒定試劑（盒）或鑒定板/卡，檢測(cè)方法/原理為生化法（包括比色法、比濁法），據(jù)此確定產(chǎn)品的通用名稱(chēng)為革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑盒（比色法/生化法/比濁法）或革蘭陽(yáng)性菌鑒定板/卡（比色法/生化法/比濁法）。

1.2描述申報(bào)產(chǎn)品預(yù)期用途

一般根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧氣的耐受性或鏡下形態(tài)，將預(yù)期用途表述為：

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性需氧菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性厭氧菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性兼性厭氧菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性需氧和兼性厭氧菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定。

申請(qǐng)人可依據(jù)產(chǎn)品所涵蓋的革蘭陽(yáng)性菌的具體特征對(duì)預(yù)期用途進(jìn)行聲稱(chēng)。

1.3如適用，描述有關(guān)申報(bào)產(chǎn)品的背景信息概述或特別細(xì)節(jié)，如：申報(bào)產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

描述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來(lái)源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗(yàn)方法。

注：技術(shù)原理包括反應(yīng)原理（如生化法），方法學(xué)（如比色法/比濁法），信號(hào)處理方法，結(jié)果解讀方式等。

2.1.1描述產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)，包括分析性能評(píng)估、陽(yáng)性判斷值、穩(wěn)定性及臨床評(píng)價(jià)等。

2.1.2描述不同包裝規(guī)格之間的差異。

2.1.3描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如適用）的生物學(xué)來(lái)源（如動(dòng)物、發(fā)酵產(chǎn)物）和（或）組織來(lái)源（如動(dòng)物心臟等）。人源性材料（如適用）須對(duì)有關(guān)傳染病（HIV、HBV、HCV等）病原體檢測(cè)予以說(shuō)明；其他動(dòng)物源及微生物來(lái)源的材料，應(yīng)當(dāng)說(shuō)明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、使用過(guò)程中對(duì)使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。

2.2包裝描述

描述試劑盒的各個(gè)組分、所有規(guī)格及不同規(guī)格的劃分說(shuō)明，試劑盒組分、外包裝及組分包裝所用的材質(zhì)、包裝的形狀，外包裝盒上面應(yīng)包含產(chǎn)品名稱(chēng)、批號(hào)、生產(chǎn)日期及失效日期、注冊(cè)人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)、生產(chǎn)地址、聯(lián)系方式等信息。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請(qǐng)注冊(cè)產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)提供同類(lèi)產(chǎn)品或前代產(chǎn)品的信息，并說(shuō)明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類(lèi)和/或前代產(chǎn)品的比較

對(duì)已有同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品上市，申請(qǐng)人應(yīng)提供其產(chǎn)品名稱(chēng)、生產(chǎn)企業(yè)、注冊(cè)情況，并列表比較申報(bào)產(chǎn)品與同類(lèi)產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品在技術(shù)原理、預(yù)期用途、使用方法、性能指標(biāo)、臨床應(yīng)用情況等方面的異同。

3.預(yù)期用途及使用環(huán)境

3.1明確產(chǎn)品預(yù)期用途，寫(xiě)明適用儀器（如適用）、使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、檢測(cè)類(lèi)型（定性）、樣本類(lèi)型（來(lái)源于臨床樣本分離的純菌）等。

3.2臨床適應(yīng)證、適用人群

臨床上，革蘭陽(yáng)性菌引起的感染呈多樣性，究其原因?yàn)榘募?xì)菌種類(lèi)廣泛，感染部位不同，病原菌的種類(lèi)也千差萬(wàn)別，如呼吸道感染引起的疾病常檢出的菌種類(lèi)有金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌等；泌尿道感染常檢出的菌種類(lèi)有屎腸球菌、糞腸球菌、金黃色葡萄球菌等；血液感染常檢出的菌種類(lèi)有表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、人葡萄球菌等；傷口膿液常檢出的有金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、屎腸球菌等；腦脊液常檢出的菌種類(lèi)有表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、頭葡萄球菌等。

寫(xiě)明產(chǎn)品需專(zhuān)業(yè)人員使用。明確產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)室中使用，如有可能會(huì)影響其安全性和有效性的環(huán)境條件（如溫度、濕度、海拔）應(yīng)注明。

4.申報(bào)產(chǎn)品上市歷史：如適用，應(yīng)當(dāng)提交申報(bào)產(chǎn)品的下列資料：上市情況、不良事件和召回、銷(xiāo)售/不良事件及召回率。

5.其他需說(shuō)明的內(nèi)容

5.1除申報(bào)產(chǎn)品外，檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分，包括但不限于：適用儀器、質(zhì)控菌株、獨(dú)立軟件等基本信息，及其在檢測(cè)中發(fā)揮的作用，必要時(shí)應(yīng)提交相應(yīng)的說(shuō)明書(shū)。

5.2如適用，對(duì)于已獲得批準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分，應(yīng)當(dāng)提供注冊(cè)證編號(hào)和國(guó)家藥監(jiān)局官方網(wǎng)站公布的注冊(cè)證信息。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管理資料

申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見(jiàn)的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，應(yīng)符合GB/T 42062《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

風(fēng)險(xiǎn)管理資料應(yīng)包含以下內(nèi)容：

1.1概述：簡(jiǎn)要介紹風(fēng)險(xiǎn)管理資料的編制依據(jù)、適用范圍、產(chǎn)品描述（名稱(chēng)、用途、適用機(jī)型）、風(fēng)險(xiǎn)管理計(jì)劃及實(shí)施情況等。

1.2風(fēng)險(xiǎn)管理人員及其職責(zé)分工：明確風(fēng)險(xiǎn)管理小組成員及職責(zé)，制定風(fēng)險(xiǎn)管理流程圖，明確風(fēng)險(xiǎn)管理活動(dòng)的評(píng)審要求等。

1.3風(fēng)險(xiǎn)來(lái)源分析：明確風(fēng)險(xiǎn)可能的來(lái)源（如產(chǎn)品故障、使用條件或環(huán)境差異、用戶(hù)端風(fēng)險(xiǎn)、產(chǎn)品壽命等）。

1.4預(yù)期用途和安全性有關(guān)特征的判定：以GB/T 42062附錄C為基礎(chǔ)，判定產(chǎn)品預(yù)期用途和與安全性有關(guān)的特性，判定已知和可預(yù)見(jiàn)的危害、對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估，并形成問(wèn)題清單。申請(qǐng)人可以根據(jù)產(chǎn)品特征確定其他可能危害，采取相應(yīng)控制措施，確保產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)降至可接受的程度。

1.5風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)控制和風(fēng)險(xiǎn)控制措施：對(duì)每一判定為危害的不正確結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分析，并制定相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制方案及措施。

1.6綜合剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性評(píng)價(jià)：對(duì)比采取風(fēng)險(xiǎn)控制措施前后的風(fēng)險(xiǎn)情況，對(duì)剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.7風(fēng)險(xiǎn)控制措施驗(yàn)證：對(duì)風(fēng)險(xiǎn)控制措施的有效性進(jìn)行驗(yàn)證分析。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

申請(qǐng)人需提供《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》，并說(shuō)明產(chǎn)品為了符合適用的各項(xiàng)要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對(duì)于不適用的各項(xiàng)要求，應(yīng)說(shuō)明理由。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求根據(jù)《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導(dǎo)原則》等規(guī)范性文件進(jìn)行編制。產(chǎn)品技術(shù)要求主要包含包裝規(guī)格、性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法，性能指標(biāo)主要包括外觀(guān)、準(zhǔn)確性、重復(fù)性、批間差、pH值（如適用）等。

3.2檢驗(yàn)報(bào)告

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗(yàn)報(bào)告：

3.2.1具有自檢能力的注冊(cè)申請(qǐng)人出具的注冊(cè)自檢報(bào)告。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。

4.分析性能研究

申請(qǐng)人應(yīng)采用在生產(chǎn)質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的試劑對(duì)分析性能進(jìn)行研究，應(yīng)當(dāng)包括研究方案、數(shù)據(jù)、結(jié)果分析和總結(jié)，提供證據(jù)的總結(jié)及證據(jù)充分性的論證。

如申報(bào)產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行評(píng)估的資料。如申報(bào)產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對(duì)各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗(yàn)證。

建議著重對(duì)以下性能進(jìn)行研究：

4.1適用的樣本類(lèi)型

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)菌株的來(lái)源、分離、制備或處理過(guò)程進(jìn)行研究或說(shuō)明。如不同樣本來(lái)源的菌株其分離、制備或處理過(guò)程存在差異，均應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的研究或說(shuō)明。

分析性能研究中使用的菌株建議不超過(guò)5代，并對(duì)其來(lái)源進(jìn)行說(shuō)明。

4.2適用樣本穩(wěn)定性

本產(chǎn)品適用的樣本為來(lái)源于臨床樣本分離的純菌，為了保證樣本中待測(cè)菌的活性，采集臨床樣本后，建議立即接種純化菌，應(yīng)對(duì)制備的菌懸液及純化后菌株的保存條件及期限進(jìn)行研究。

4.3 pH值（如適用）

根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)，如培養(yǎng)基未包被在固體載物中時(shí)，鑒定培養(yǎng)液或鑒定稀釋液對(duì)pH有特殊要求時(shí)需要限定pH值，用pH計(jì)測(cè)定，結(jié)果應(yīng)符合申請(qǐng)人設(shè)定的pH范圍。

4.4準(zhǔn)確性

根據(jù)試劑板條鑒定范圍，選取不少于2株的菌株進(jìn)行準(zhǔn)確性試驗(yàn)，菌株可使用標(biāo)準(zhǔn)菌株或臨床菌株，如ATCC、CMCC、CICC的參考菌株等。窄譜（單菌屬）鑒定板條選取至少2株；對(duì)于廣譜板條，對(duì)臨床常見(jiàn)或重要菌屬（種）至少每屬選取一株，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知菌相符。

臨床常見(jiàn)或重要菌屬（種）如下（YY/T 1531 附錄A）：

4.4.1葡萄球菌屬鑒定：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌；

4.4.2鏈球菌屬鑒定：A群鏈球菌或B群鏈球菌、肺炎鏈球菌、草綠色鏈球菌；

4.4.3腸球菌屬：糞腸球菌或屎腸球菌；

4.4.4棒狀桿菌鑒定：白喉棒桿菌；

4.4.5微球菌屬鑒定：藤黃微球菌；

4.4.6芽孢桿菌鑒定：蠟樣芽孢桿菌；

4.4.7李斯特菌屬鑒定：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特菌。

4.5精密度

4.5.1重復(fù)性

重復(fù)性指在重復(fù)性條件下的精密度。申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)試劑板條類(lèi)別，選取質(zhì)控菌株（可使用標(biāo)準(zhǔn)菌株或臨床菌株）對(duì)同一批號(hào)試劑進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)檢測(cè)不少于3個(gè)板條，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知結(jié)果相符。

4.5.2中間精密度

應(yīng)考慮運(yùn)行、時(shí)間、操作者、儀器和地點(diǎn)等影響精密度的條件，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)價(jià)。

批間精密度應(yīng)用質(zhì)控菌株（可使用標(biāo)準(zhǔn)菌株或臨床菌株）對(duì)至少3個(gè)批號(hào)試劑進(jìn)行檢測(cè)，每一批號(hào)采用不少于3個(gè)鑒定板條進(jìn)行檢測(cè)，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知結(jié)果相符。

申請(qǐng)人應(yīng)設(shè)定合理的精密度評(píng)價(jià)周期，具體方案可參考性能評(píng)價(jià)相關(guān)文件進(jìn)行。

用于精密度評(píng)價(jià)的臨床樣本應(yīng)至少包含3個(gè)菌屬（廣譜）或菌株（窄譜）多次（n≥20）檢測(cè)，鑒定結(jié)果應(yīng)與所用菌屬或菌株名稱(chēng)相符。

5.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（貨架有效期）、使用穩(wěn)定性（如適用）、運(yùn)輸穩(wěn)定性等，注冊(cè)申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

上述研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【儲(chǔ)存條件及有效期】項(xiàng)中載明。

6.陽(yáng)性判斷值研究

生化鑒定涉及多個(gè)生化反應(yīng)指標(biāo)，其最終結(jié)果需要結(jié)合各個(gè)指標(biāo)的結(jié)果進(jìn)行綜合判斷，目前綜合判斷的方法主要包括雙歧索引法（雙歧分類(lèi)法）、表解法和數(shù)值分類(lèi)法等，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的特性建立合理的鑒定方法，并對(duì)相應(yīng)的鑒定方法充分的論證。

申請(qǐng)人如采用數(shù)值分類(lèi)法建立鑒定可信度，應(yīng)考慮菌株的不同類(lèi)別。鑒定可信度指生化鑒定結(jié)果的可信賴(lài)程度，即待測(cè)菌生化反應(yīng)譜與數(shù)據(jù)庫(kù)中建庫(kù)菌生化反應(yīng)譜的匹配程度，匹配程度越高結(jié)果越可信，申請(qǐng)人應(yīng)考慮鑒定結(jié)果的可信度，可根據(jù)待測(cè)菌與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配度給出一定的閾值，明確參數(shù)確定的依據(jù)。

本指導(dǎo)原則適用于人體樣本中分離后的純菌（富集的高濃度）的鑒定，純菌的生化特征是明確的，而對(duì)于手工檢測(cè)的產(chǎn)品，可直接將檢測(cè)結(jié)果與比色卡進(jìn)行對(duì)比，從而判斷鑒定結(jié)果。

（四）臨床評(píng)價(jià)資料

該產(chǎn)品列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，申請(qǐng)人應(yīng)按照《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》提交臨床評(píng)價(jià)資料。如免臨床試驗(yàn)的相關(guān)指導(dǎo)原則有更新，應(yīng)符合相應(yīng)的指導(dǎo)原則要求。

申請(qǐng)人可將待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品進(jìn)行比對(duì)，證明待評(píng)價(jià)試劑與已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測(cè)量程序/診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性。此處所述實(shí)質(zhì)性等同，指預(yù)期用途相同，且具有相同的安全性與有效性。

1.對(duì)比試劑的選擇

免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑，如采用《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》所述方式進(jìn)行方法學(xué)對(duì)比，應(yīng)通過(guò)比對(duì)分析確定與待評(píng)價(jià)試劑相適宜的境內(nèi)已上市產(chǎn)品作為對(duì)比試劑。

申請(qǐng)人應(yīng)首先對(duì)待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品的預(yù)期用途進(jìn)行比對(duì)分析。預(yù)期用途是指體外診斷試劑的一般用途或功能，包括樣本類(lèi)型、被測(cè)物和適應(yīng)證等。適應(yīng)證是指本產(chǎn)品治療監(jiān)測(cè)或輔助診斷的疾病或狀態(tài)，包括適用人群。

對(duì)比試劑需滿(mǎn)足以下條件：境內(nèi)已經(jīng)取得上市許可；與待評(píng)價(jià)試劑具有相同的預(yù)期用途；優(yōu)先選擇與待評(píng)價(jià)試劑檢測(cè)結(jié)果偏差較小的試劑，不建議選擇性能劣于待評(píng)價(jià)試劑的作為對(duì)比試劑。

注：比對(duì)項(xiàng)目包括但不限于上述項(xiàng)目，可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行修改。

如通過(guò)對(duì)比分析無(wú)法證明待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測(cè)量程序/診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性，應(yīng)通過(guò)臨床試驗(yàn)的方式對(duì)申報(bào)試劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2.試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)過(guò)程由申請(qǐng)人進(jìn)行管理并負(fù)責(zé)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性、合規(guī)性及完整性。境外申請(qǐng)人如需進(jìn)行中國(guó)境內(nèi)開(kāi)展的方法學(xué)比對(duì)研究，應(yīng)通過(guò)其在中國(guó)的代理人在中國(guó)境內(nèi)開(kāi)展試驗(yàn)。

申請(qǐng)人也可以提交在境外完成的試驗(yàn)資料，資料內(nèi)容應(yīng)滿(mǎn)足本指導(dǎo)原則的技術(shù)要求。申請(qǐng)人還應(yīng)充分考慮流行病學(xué)差異、受試人群的差異、使用的環(huán)境與條件差異等對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生的可能影響。必要時(shí)，申請(qǐng)人應(yīng)針對(duì)差異因素在我國(guó)境內(nèi)進(jìn)行補(bǔ)充研究。

3.試驗(yàn)人員

試驗(yàn)操作人員應(yīng)為具有相應(yīng)試驗(yàn)?zāi)芰Φ膶?zhuān)業(yè)技術(shù)人員，并熟悉待評(píng)價(jià)試劑和對(duì)比試劑的檢測(cè)流程。

4.試驗(yàn)樣本

應(yīng)采用與預(yù)期用途聲稱(chēng)樣本類(lèi)型一致的來(lái)源于人體樣本的菌株進(jìn)行試驗(yàn)，樣本背景信息應(yīng)清晰，樣本來(lái)源應(yīng)可溯源。樣本背景信息包括但不限于：樣本來(lái)源、唯一且可追溯的編號(hào)、樣本類(lèi)型和其他與該檢測(cè)相關(guān)的背景信息（如年齡、性別等）。

樣本采集方式及穩(wěn)定性應(yīng)符合待評(píng)價(jià)試劑和對(duì)比試劑說(shuō)明書(shū)有關(guān)要求。

5.試驗(yàn)時(shí)間

試驗(yàn)應(yīng)考慮到臨床實(shí)際使用情況和日間精密度影響，在保證符合樣本穩(wěn)定性的條件下，設(shè)定合理的持續(xù)時(shí)間，如3～20天，應(yīng)對(duì)所有樣本進(jìn)行編盲，采用待評(píng)價(jià)試劑和對(duì)比試劑分別進(jìn)行隨機(jī)檢測(cè)，整個(gè)試驗(yàn)應(yīng)有質(zhì)量控制。

6.試驗(yàn)方法

試驗(yàn)方法可參考境內(nèi)外有關(guān)方法學(xué)比對(duì)的技術(shù)指導(dǎo)文件，并重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容。

6.1樣本要求

研究應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品鑒定板條的種類(lèi)納入菌株，如廣譜鑒定板涵蓋的菌株種類(lèi)較多，總體樣本例數(shù)可能高于《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》規(guī)定的樣本量的要求。對(duì)于適用于革蘭陽(yáng)性菌鑒定的廣譜鑒定板或窄譜鑒定板申請(qǐng)人可參考附件中革蘭陽(yáng)性菌的相關(guān)介紹并根據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途納入相應(yīng)菌屬。研究樣本數(shù)量將影響可信區(qū)間寬度，擴(kuò)大樣本量，將獲得更窄的可信區(qū)間。

申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途、適用人群、臨床適應(yīng)證、臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)等綜合情況充分考慮各種影響因素，采用合理的方法確定樣本數(shù)量。

6.2數(shù)據(jù)收集期間檢查

在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，應(yīng)對(duì)所有數(shù)據(jù)及時(shí)記錄并檢查。如確定某些異常結(jié)果由可解釋的原因引起，應(yīng)記錄原因并將其剔除出數(shù)據(jù)分析。如不能確定原因，須將原始結(jié)果保留在數(shù)據(jù)集中。

6.3統(tǒng)計(jì)分析

申請(qǐng)人應(yīng)綜合考慮數(shù)據(jù)特征等因素，確定具體的統(tǒng)計(jì)分析方法，并提供其選擇依據(jù)。評(píng)價(jià)待評(píng)價(jià)試劑與對(duì)比試劑的一致性，計(jì)算待評(píng)價(jià)試劑與對(duì)比試劑的鑒定結(jié)果符合率，計(jì)算方法詳情見(jiàn)下表2，總體符合率95%置信區(qū)間下限應(yīng)不低于90%。

鑒定結(jié)果符合率：待評(píng)價(jià)試劑與對(duì)比試劑鑒定結(jié)果一致的樣本數(shù)占總樣本數(shù)的比例。即：鑒定結(jié)果符合率=a/n×100%。

6.4不一致結(jié)果的處理

待評(píng)價(jià)試劑與對(duì)比試劑的不一致可能源于待評(píng)價(jià)試劑或?qū)Ρ仍噭┑恼`差，不一致結(jié)果可通過(guò)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)或其他合理方法進(jìn)行確認(rèn)并分析原因，確認(rèn)結(jié)果不應(yīng)納入統(tǒng)計(jì)分析。

6.5統(tǒng)計(jì)分析中應(yīng)注意的問(wèn)題

6.5.1樣本剔除應(yīng)有合理理由，不可隨意剔除。如確需剔除，應(yīng)說(shuō)明剔除數(shù)量及理由。

6.5.2應(yīng)參考權(quán)威技術(shù)指南等，根據(jù)產(chǎn)品適用的統(tǒng)計(jì)分析模型，計(jì)算符合率。

臨床試驗(yàn)檢測(cè)菌應(yīng)充分考慮菌株類(lèi)型，應(yīng)包含產(chǎn)品預(yù)期用途所涉及的菌，對(duì)于不常見(jiàn)的臨床菌株可適量采用凍存菌株進(jìn)行研究。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽樣稿

說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本類(lèi)型、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說(shuō)明書(shū)除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說(shuō)明書(shū)的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

下面對(duì)革蘭陽(yáng)性菌鑒定試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

1.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

1.1該產(chǎn)品用于定性檢測(cè)臨床分離的革蘭染色陽(yáng)性細(xì)菌的鑒定，適用范圍應(yīng)結(jié)合申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能的確認(rèn)情況進(jìn)行描述（如：適用于革蘭陽(yáng)性桿菌或球菌或某個(gè)具體種屬，需氧或兼性厭氧或?qū)Ｐ詤捬醯龋?/p>

1.2應(yīng)闡述與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證及背景情況，說(shuō)明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。

2.【檢驗(yàn)原理】

描述生化鑒定方法、原理等。

描述試劑盒的技術(shù)原理，可結(jié)合圖示進(jìn)行說(shuō)明。如反應(yīng)體系中包含哪些類(lèi)型的反應(yīng)（如酶活性、耐藥性等），如何得到最終的鑒定結(jié)果。

3.【主要組成成分】

3.1詳細(xì)說(shuō)明試劑盒內(nèi)各組分的名稱(chēng)、數(shù)量、主要組成成分、最低分裝量等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應(yīng)說(shuō)明其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性；說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

3.2試劑盒中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱(chēng)以及備案憑證號(hào)或注冊(cè)證號(hào)（如有）等信息。

4.【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑盒的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、拆封穩(wěn)定性（如適用）、運(yùn)輸穩(wěn)定性、凍融次數(shù)要求（如涉及）等。

4.1對(duì)試劑盒的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、拆封穩(wěn)定性（如適用）等信息做詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩(wěn)定性的條件。如試劑需要配制，則應(yīng)對(duì)配制后的試劑的儲(chǔ)存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。

4.2如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應(yīng)對(duì)各組分的儲(chǔ)存條件和有效期分別進(jìn)行描述。

4.3對(duì)于可以冷凍的試劑應(yīng)注明凍融次數(shù)限制。

4.4注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見(jiàn)標(biāo)簽）。

5.【適用儀器】

說(shuō)明可適用的儀器及型號(hào)，不能泛指某一系列儀器，并提供與儀器有關(guān)的信息以便用戶(hù)能夠正確選擇使用；若不同規(guī)格適用不同機(jī)型也應(yīng)說(shuō)明，且應(yīng)與分析性能研究資料一致。

6.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容

6.1樣本要求：應(yīng)注明樣本要求（如樣本應(yīng)為臨床分離的純菌落）。

6.2樣本培養(yǎng)條件要求：應(yīng)注明樣本培養(yǎng)條件及時(shí)長(zhǎng)（如應(yīng)于普通溫箱或二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～72小時(shí)，溫箱選擇取決于菌種類(lèi)型，培養(yǎng)時(shí)長(zhǎng)依據(jù)菌種生長(zhǎng)情況），對(duì)于凍存菌種有無(wú)要求（如凍存菌株需要活化并傳代后使用）。

6.3樣本活化用培養(yǎng)基要求：應(yīng)注明活化菌株用培養(yǎng)基有無(wú)要求。

6.4樣本保存條件：應(yīng)注明臨床分離純菌的培養(yǎng)后保存條件。

6.5樣本制備后（菌懸液）保存條件：應(yīng)注明菌懸液保存條件。

上述描述均應(yīng)建立在相關(guān)性能評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究的基礎(chǔ)上。

7.【檢驗(yàn)方法】

描述自動(dòng)分析的工作流程或者詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，例如：

7.1詳細(xì)說(shuō)明各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的處理程序、試劑的使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、注意事項(xiàng)等。

7.2詳細(xì)描述待測(cè)樣本菌懸液制備方法，包括步驟及注意事項(xiàng)。

7.3描述接種量：加樣體積、順序等。

7.4描述手工或上機(jī)操作等。

7.5質(zhì)量控制方法：質(zhì)量控制的建議及相關(guān)操作步驟等。

8.【陽(yáng)性判斷值】

結(jié)合陽(yáng)性判斷值確定的研究資料，列出試劑的陽(yáng)性判斷值，并簡(jiǎn)要說(shuō)明陽(yáng)性判斷值確定的方法。

9.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)合臨床結(jié)果應(yīng)有明確的解釋?zhuān)绯霈F(xiàn)異常情況可能的原因是哪些，如何處理，應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)描述。

10.【檢驗(yàn)方法局限性】

10.1本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者的癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果等情況進(jìn)行綜合分析以及解釋?zhuān)坏米鳛榛颊吲R床診治或管理的唯一依據(jù)。

10.2變異的菌種可能導(dǎo)致不能正確識(shí)別。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

描述產(chǎn)品性能，包括以下內(nèi)容：

11.1準(zhǔn)確性：說(shuō)明準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)結(jié)果，如：使用規(guī)定的質(zhì)控菌株進(jìn)行測(cè)試，鑒定結(jié)果與質(zhì)控菌株名稱(chēng)相符。

11.2精密度：說(shuō)明精密度的評(píng)價(jià)結(jié)果，如：重復(fù)性、中間精密度等性能。

12.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

12.1如產(chǎn)品含有動(dòng)物源性物質(zhì)，應(yīng)提供具有潛在傳染性的警示性信息。

12.2如產(chǎn)品出現(xiàn)某些顯性性狀時(shí)，應(yīng)提示相應(yīng)的措施，如包裝袋破損不得使用等。

12.3臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格遵守國(guó)家生物安全相關(guān)法律法規(guī)，對(duì)使用的板卡進(jìn)行規(guī)范處理等。

（六）質(zhì)量管理體系文件

質(zhì)量管理體系文件主要包括生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責(zé)程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)程序質(zhì)量、管理體系的測(cè)量/分析/改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息、質(zhì)量管理體系核查文件。申請(qǐng)人應(yīng)按照相關(guān)法規(guī)要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，確保產(chǎn)品在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)。

三、參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法:國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48號(hào)[Z].

[2]原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.6840體外診斷試劑分類(lèi)子目錄(2013年):食品藥品監(jiān)管總局通知242號(hào)[Z].

[3]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑分類(lèi)規(guī)則:國(guó)家藥監(jiān)局公告2021年第129號(hào)[Z].

[4]GB/T 42062,醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用[S].

[5]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單:國(guó)家藥監(jiān)局公告2021年第122號(hào)[Z].

[6]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥監(jiān)局公告2022年第8號(hào)[Z].

[7]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥監(jiān)局通告2021年第74號(hào)[Z].

[8]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄:國(guó)家藥監(jiān)局通告2021年第70號(hào)[Z].

[9]原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則:國(guó)家食品藥品監(jiān)管總局通告2014年第17號(hào)[Z].

[10]YY/T 1531,細(xì)菌生化鑒定系統(tǒng)[S].

附件

革蘭陽(yáng)性菌及其鑒定簡(jiǎn)介

革蘭陽(yáng)性菌是指細(xì)胞壁較厚，經(jīng)革蘭染色后呈紫色的一類(lèi)細(xì)菌。根據(jù)鏡下形態(tài)，可分為革蘭陽(yáng)性球菌、革蘭陽(yáng)性桿菌。臨床革蘭陽(yáng)性球菌屬主要包括葡萄球菌屬、微球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬等，其中葡萄球菌屬多為兼性厭氧菌，代表性菌為金黃色葡萄球菌；微球菌屬多為需氧菌，包括藤黃微球菌、里拉微球菌、南極微球菌和內(nèi)生微球菌等；鏈球菌屬多為兼性厭氧菌，代表菌為化膿鏈球菌；腸球菌屬為兼性厭氧菌，代表菌為糞腸球菌和屎腸球菌。臨床革蘭陽(yáng)性桿菌主要包括李斯特菌屬、棒桿菌屬等，李斯特菌屬為兼性厭氧菌，代表性菌為單核細(xì)胞增生李斯特菌；棒桿菌屬為需氧或兼性厭氧菌，代表菌為白喉棒桿菌。

根據(jù)其對(duì)氧氣的耐受性，革蘭陽(yáng)性菌可分為需氧型、厭氧型、兼性厭氧型，如：藤黃微球菌為需氧型、艱難梭菌為厭氧型、肺炎鏈球菌為兼性厭氧型。

革蘭陽(yáng)性菌的鑒定是將待測(cè)樣本中革蘭陽(yáng)性菌按其生物學(xué)特征與已知革蘭陽(yáng)性菌進(jìn)行比對(duì)分析，確定待測(cè)樣本中革蘭陽(yáng)性菌的分類(lèi)單元。

革蘭陽(yáng)性菌的實(shí)驗(yàn)室鑒定方法如顯微鏡法、生化法、血清學(xué)法、質(zhì)譜鑒定、分子生物學(xué)鑒定等。（1）顯微鏡法：使用顯微鏡觀(guān)察目的菌的形態(tài)、大小、染色等特征，該方法對(duì)人員的技術(shù)要求較高，且只適用于初步鑒定；（2）生化法：由于不同微生物體內(nèi)的酶系統(tǒng)、新陳代謝的類(lèi)型等的不同，可導(dǎo)致其對(duì)各種物質(zhì)利用后所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同，利用微生物的生理生化反應(yīng)來(lái)測(cè)定微生物的代謝產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)微生物的鑒定，此方法是微生物學(xué)中應(yīng)用較早且較廣泛的一種方法；（3）血清學(xué)：用含有已知特異性抗體的免疫血清（診斷血清）與分離培養(yǎng)出的待測(cè)樣本中純菌或樣本中的抗原進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)，以確定細(xì)菌的種或型；（4）質(zhì)譜鑒定：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜，通過(guò)建立標(biāo)準(zhǔn)或已知菌的數(shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合儀器算法將待測(cè)樣本中細(xì)菌的蛋白峰與已知細(xì)菌比對(duì)分析，達(dá)到鑒定細(xì)菌的目的；（5）分子生物學(xué)：基于分子生物學(xué)原理，檢測(cè)方法主要包括DNA堿基比例的測(cè)定、核酸分子雜交、16s rDNA序列分析法、全基因組序列的測(cè)定等，臨床微生物鑒定應(yīng)用較多的是核酸分子雜交，根據(jù)探針特異性的不同，可以鑒定某一菌型或某一種屬甚至更大菌群，可以準(zhǔn)確、快速的進(jìn)行微生物的鑒定。