國(guó)家藥監(jiān)局關(guān)于發(fā)布貼敷類醫(yī)療器械中17種化學(xué)藥物識(shí)別及含量測(cè)定補(bǔ)充檢驗(yàn)方法的公告（2022年第12號(hào)）

發(fā)布時(shí)間：2022-01-26

根據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》第七十六條規(guī)定，國(guó)家藥監(jiān)局審核批準(zhǔn)《貼敷類醫(yī)療器械中17種化學(xué)藥物識(shí)別及含量測(cè)定補(bǔ)充檢驗(yàn)方法》，現(xiàn)予發(fā)布。

特此公告。

附件：貼敷類醫(yī)療器械中17種化學(xué)藥物識(shí)別及含量測(cè)定補(bǔ)充檢驗(yàn)方法.doc

國(guó)家藥監(jiān)局
2022年1月25日

貼敷類醫(yī)療器械中17種化學(xué)藥物
識(shí)別及含量測(cè)定補(bǔ)充檢驗(yàn)方法

1 適用產(chǎn)品范圍

本方法適用于以物理升溫、物理退熱、穴位壓力刺激或者磁場(chǎng)作用等原理的貼敷類醫(yī)療器械。品名舉例：遠(yuǎn)紅外治療貼、醫(yī)用冷敷貼、醫(yī)用退熱貼、冷敷凝膠、磁療貼、穴位壓力刺激貼等。

本方法不適用于以鐵粉氧化升溫致熱為工作原理的熱療貼、熱灸貼等產(chǎn)品。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。

3 通則

3.1本方法中的室溫，如無特殊規(guī)定，應(yīng)為10 ℃～30 ℃。

3.2本方法中試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682的要求。

3.3本方法中所用容器如無特殊規(guī)定，應(yīng)為硅硼酸鹽玻璃容器。

3.4本方法中所涉及的量取，應(yīng)使用符合相應(yīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的準(zhǔn)確度要求的移液管量取。

4 測(cè)定方法

4.1 概述

高效液相色譜儀的二極管陣列檢測(cè)器（DAD）能夠進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，靈敏度較高，且應(yīng)用普遍、易于操作。高分辨的一級(jí)（MS）、二級(jí)質(zhì)譜（MS2）數(shù)據(jù)能夠給出更加準(zhǔn)確可靠的結(jié)構(gòu)信息。本方法采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行初篩，高分辨液質(zhì)聯(lián)用法（HRMS/MS）或等效的液質(zhì)聯(lián)用法進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證后的陽性樣品采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行含量測(cè)定。

4.2 供試液的制備

取樣品1貼，撕開不粘層，展開，貼在定量濾紙上，用剪刀裁去多余濾紙，然后將樣品剪成0.5 cm×0.5 cm的小片，置于150 mL燒瓶中，加入甲醇適量將樣品完全浸沒，70 ℃回流兩次，每次2 h。將浸提液轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用少量甲醇洗滌樣品三次，合并洗滌液至容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻。取上述溶液經(jīng)0.2 μm微孔濾膜過濾后作為供試液，必要時(shí)可進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)的稀釋。

4.3高效液相色譜法

4.3.1 儀器與試劑

4.3.1.1 儀器

高效液相色譜儀，配有二極管陣列檢測(cè)器。

4.3.1.2 試劑

a）甲醇：色譜純，CAS# 67-56-1;

b）乙腈：色譜純，CAS# 75-05-8;

c）磷酸：分析純，CAS# 7664-38-2;

d）17種藥物信息見表1。

表1 17種藥物信息

4.3.2藥物對(duì)照品儲(chǔ)備溶液的配制

分別取4.3.1.2中17種藥物對(duì)照品各約10 mg，精密稱定，置10 mL棕色容量瓶中，加入甲醇溶解后定容，搖勻，配制成濃度為1 mg/mL的藥物對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。

4.3.3高效液相色譜條件（推薦）

4.3.3.1色譜柱：XBridge BEH Shield RP18 2.5 μm 4.6×150 mm，或其他等效色譜柱。

4.3.3.2柱溫：35 ℃，樣品室溫度：10 ℃;

4.3.3.3流速：1 mL/min;

4.3.3.4檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm，掃描范圍：190 nm～400 nm;

4.3.3.5進(jìn)樣量：10 μL。

4.3.3.6流動(dòng)相：A（pH 3.0的磷酸水溶液）B（甲醇：乙腈 1：1），梯度條件見表2。

表2 HPLC法流動(dòng)相梯度條件

4.3.4系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

4.3.4.1 分離度

取4.3.2中17種藥物對(duì)照品儲(chǔ)備溶液各0.1 mL于10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制成濃度為10 mg/L的混合對(duì)照溶液，取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，17種對(duì)照品的色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5。

4.3.4.2 靈敏度

取4.3.2中17種藥物對(duì)照品儲(chǔ)備溶液適量，分別用甲醇稀釋至表3中“檢出限（LOD）”的濃度，取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，17種對(duì)照品的色譜峰信噪比（S/N）均應(yīng)大于3:1。

表3 17種藥物靈敏度要求

4.4高分辨液質(zhì)聯(lián)用法

4.4.1 儀器與試劑

4.4.1.1 儀器

高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀

4.4.1.2 試劑

a）甲醇：質(zhì)譜純，CAS# 67-56-1;

b）乙酸銨：質(zhì)譜純，CAS# 631-61-8;

c）17種藥物對(duì)照品同4.3.1.2 d）。

4.4.2對(duì)照品溶液配制

同4.3.4.1中濃度為10 mg/L的混合對(duì)照溶液配制。

4.4.3色譜條件（示例）

4.4.3.1色譜柱：Hypersil Gold 100×2.1 mm 1.9 μm，或其他等效色譜柱。

4.4.3.2 柱溫：40 ℃，樣品室溫度：10 ℃;

4.4.3.3 流速：0.2 mL/min;

4.4.3.4 檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm;

4.4.3.5進(jìn)樣量：2 μL。

4.4.3.6 流動(dòng)相：A（10 mmol/L乙酸銨的水溶液）B（甲醇），梯度條件見表4。

表4 HPLC-HRMS/MS法流動(dòng)相梯度條件

4.4.4質(zhì)譜條件（示例）

4.4.4.1 儀器型號(hào)：Themo Q-Exactive Focus型高分辨液質(zhì)聯(lián)用儀。

4.4.4.2 離子源：ESI 掃描模式：正負(fù)切換;

4.4.4.3 鞘氣：30 arb 輔助氣：8 arb 吹掃氣：0 arb;

4.4.4.4 電噴霧電壓：3.0 kV;

4.4.4.5 毛細(xì)管溫度：320 ℃;

4.4.4.6 傳輸透鏡電壓：55.0 %;

4.4.4.7 輔助氣加熱溫度：300 ℃;

4.4.4.8 17種藥物測(cè)定參數(shù)見表5。

表5 17種藥物檢測(cè)模式、二級(jí)能量及碎片離子

注：*為基峰

4.5藥物識(shí)別及其含量測(cè)定

取4.2制備的供試液及4.3.4.1制備的10 mg/L的混合對(duì)照溶液，按照4.3.3的方法進(jìn)樣分析。將二者結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，以保留時(shí)間（tR）及190 nm~400 nm的紫外光譜圖一致性作為初篩依據(jù)。

取可能含有藥物的供試液及相應(yīng)藥物對(duì)照品溶液，按照4.4.3、4.4.4的方法進(jìn)樣分析。將供試液與對(duì)照品溶液的母離子及碎片離子信息進(jìn)行對(duì)比，二者一致則確認(rèn)該樣品中含有相應(yīng)的藥物成分。

取4.3.2中陽性樣品中所含藥物的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液，配制成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照4.3.3的方法進(jìn)樣分析。繪制濃度-峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)峰面積計(jì)算樣品中藥物的量。圖1給出了17種藥物的典型色譜圖。

4.6其他藥物識(shí)別方法

本方法中給出了17種藥物的識(shí)別和含量測(cè)定方法，如關(guān)注其他可能添加的藥物，也可采用經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證的方法進(jìn)行分析。

5 結(jié)果判定

供試液中不得檢出上述17種藥物成分（檢出限見表3）。

起草單位：山東省醫(yī)療器械和藥品包裝檢驗(yàn)研究院

復(fù)核單位：深圳市藥品檢驗(yàn)研究院
　　　　　　　安徽省食品藥品檢驗(yàn)研究院