附件：人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑臨床前注冊審查指導(dǎo)原則（2022年第36號）.doc

人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑臨床前注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑性能評價研究注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導(dǎo)原則是對人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），其病原體為人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV），亦稱艾滋病病毒，屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬。

從全球流行情況來看，HIV-1流行率最高，尤其是HIV-1的M組是全球艾滋病的主要致病原。 HIV-2型的感染人群主要分布在非洲西部國家，其他國家地區(qū)也偶有報道。

HIV的實驗室檢測主要包括HIV抗原抗體檢測、HIV核酸檢測、CD4+T淋巴細(xì)胞計數(shù)、HIV耐藥檢測等。其中HIV抗體檢測包括篩查試驗和補充試驗。

本指導(dǎo)原則適用于采用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法等免疫學(xué)方法，體外定性檢測人血清、血漿、全血、口腔黏膜滲出液、尿液等的人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑及抗原抗體聯(lián)合檢測試劑的性能評價部分。結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，可用于人類免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。對基于其他方法學(xué)或檢測靶標(biāo)的試劑、自測類檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人可以參照本指導(dǎo)原則，根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價或補充其他的評價資料進(jìn)行相應(yīng)驗證。對于該類產(chǎn)品的臨床研究資料參照《人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床研究注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》。

本指導(dǎo)原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關(guān)法規(guī)的要求，如人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑（化學(xué)發(fā)光法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等內(nèi)容。產(chǎn)品描述中應(yīng)說明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理。同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原抗體等主要組成成分、樣本類型等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

（三）非臨床資料

1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料及生產(chǎn)工藝要求。

如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。如該項目已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。

人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：物理性狀、陽性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復(fù)性、最低檢測限等。

2. 分析性能研究

申請人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實驗方案、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報資料中進(jìn)行描述，包括實驗地點，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號，儀器名稱和型號，樣本類型和來源等。分析性能評估的實驗方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行，建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究。人類免疫缺陷病毒抗原和抗體的性能應(yīng)分別研究。不同性能評估試驗建議采用不同的臨床樣本。

2.1樣本穩(wěn)定性

一般包括樣本各種實際運輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?nèi)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進(jìn)行驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本的穩(wěn)定性。可冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗證。

2.2適用的樣本類型

如果試劑適用于多種樣本類型，應(yīng)分別進(jìn)行性能評估評價每種樣本類型的適用性。如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性和各種抗凝劑的適用性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進(jìn)行最低檢測限和精密度研究，同時進(jìn)行同源比對試驗。

應(yīng)以列表形式說明各項分析性能評估中使用的樣本類型及其來源。

2.3企業(yè)參考品檢驗

根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細(xì)的實驗數(shù)據(jù)。

2.4準(zhǔn)確度

抗體檢測試劑：采用同類已上市產(chǎn)品，檢測同一套樣本的方式，比較檢測結(jié)果的差異。樣本應(yīng)選擇一定數(shù)量符合樣本穩(wěn)定性的預(yù)期人群樣本，且包含干擾及交叉樣本，納入孕婦、自身免疫系統(tǒng)疾病、慢性代謝病等人群。樣本應(yīng)注意對常見型別/流行株的覆蓋，建議包含不同來源、不同感染期（急性期、無癥狀感染期、艾滋病期）的臨床樣本。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和濃度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。

對于難以獲得臨床樣本的1型M組其他亞型、1型O組、2型可通過檢測3套及以上商業(yè)參考盤分析申報產(chǎn)品檢測結(jié)果與經(jīng)確認(rèn)結(jié)果的符合情況，評價申報產(chǎn)品的檢測準(zhǔn)確度。此處所述參考盤指已經(jīng)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)/其他成熟方法檢測確認(rèn)過的，或有準(zhǔn)確臨床診斷信息的，由多份樣本組成的一套樣本。

抗原檢測試劑：可通過臨床樣本、商業(yè)參考盤、病毒培養(yǎng)物或重組抗原樣本對上述型別進(jìn)行驗證。

2.5精密度

HIV-1 M組抗體、HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體、抗原應(yīng)分別進(jìn)行精密度研究。應(yīng)選擇臨床樣本、病毒培養(yǎng)物或重組抗原，HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體可選擇商業(yè)參考盤進(jìn)行研究。

2.5.1 重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性

申請人應(yīng)對精密度指標(biāo)的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如變異系數(shù)的范圍或顯色強度等。應(yīng)對可能影響檢測精密度的主要變量進(jìn)行驗證，包括不同時間、地點、操作者、檢測輪次、試劑批次、適用儀器（如適用）等。

設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個水平的臨床樣本進(jìn)行精密度評價，具體要求如下：

陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。

臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽性檢出率應(yīng)大于95%（n≥20）。

中/強陽性樣本：待測物濃度呈中度到強陽性，陽性檢出率為100%，變異系數(shù)（CV）應(yīng)在合理的可接受范圍內(nèi)（如適用）（n≥20）。

2.5.2 臨界值水平的精密度研究（如適用）

除上述精密度研究外，建議申請人對申報產(chǎn)品的臨界值進(jìn)行確定，并采用該濃度/水平樣本進(jìn)行精密度研究。

首先建立C50濃度，并通過對該濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，以對C50濃度進(jìn)行確認(rèn)。而后以各濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測的方式，判斷某一特定可接受范圍。

申請人可結(jié)合產(chǎn)品的特點，設(shè)置合理的（單側(cè)或雙側(cè)）置信度水平，采用合理的統(tǒng)計方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。推薦對C50±20%兩個濃度水平分別重復(fù)進(jìn)行40次檢測，當(dāng)+20%濃度水平全部為陽性，-20%濃度水平全部為陰性時，得出-20%到+ 20%濃度范圍包含C5～C95區(qū)間的置信度＞80%。

2.6包容性

抗體檢測試劑：應(yīng)選擇來源于不同時間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類免疫缺陷病毒抗體陽性的患者樣本或商業(yè)參考盤進(jìn)行檢測，建議覆蓋1型M組（包括B/B'型、 CRF 07_BC重組型、CRF 08_BC重組型、CRF 01_AE重組型、CRF 55_01B在內(nèi)的至少10種亞型或重組型）、1型O組、2型。

抗原檢測試劑：應(yīng)選擇來源于不同時間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類免疫缺陷病毒抗原陽性的患者樣本/病毒培養(yǎng)物或商業(yè)參考盤進(jìn)行包容性評價。包容性評價檢測結(jié)果應(yīng)與預(yù)期結(jié)果相符。驗證用樣本的濃度水平應(yīng)接近檢測限濃度，可采用臨床陰性樣本進(jìn)行稀釋。

2.7最低檢測限

抗體檢測試劑：至少包括1型M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、1型O組、2型。建議采用已明確人類免疫缺陷病毒抗體滴度的臨床陽性樣本，其中1型O組、2型可選用商業(yè)參考盤。一般情況下應(yīng)采用陰性樣本系列稀釋，對于口腔黏膜滲出液和尿液，可采用模擬基質(zhì)系列稀釋，稀釋后進(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和滴度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。

抗原檢測試劑：建議采用已明確人類免疫缺陷病毒抗原濃度的臨床陽性樣本/病毒培養(yǎng)液/標(biāo)準(zhǔn)品/商業(yè)參考盤或重組抗原，驗證型別與抗體檢測試劑相同。采用陰性樣本或基質(zhì)進(jìn)行系列稀釋，進(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗原類型和濃度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。最低檢出限建議不低于相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.7.1最低檢測限確定

每個型別選取至少3份樣本，系列稀釋獲得多個濃度梯度，每個濃度重復(fù)檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預(yù)設(shè)檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個濃度至少重復(fù)檢測20次，將具有95%陽性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。

2.7.2最低檢測限驗證

選擇與2.7.1不同的3份樣本，采用陰性基質(zhì)稀釋到最低檢測限濃度水平進(jìn)行驗證，應(yīng)達(dá)到95%陽性檢出率。

2.8分析特異性

2.8.1交叉反應(yīng)

用于人類免疫缺陷病毒交叉反應(yīng)驗證的病原體種類主要考慮以下幾方面：抗原結(jié)構(gòu)具有同源性、易引起相同或相似的臨床癥狀、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物。

如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應(yīng)評價。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進(jìn)行重組抗原的表達(dá)，建議考慮大腸埃希菌抗體陽性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。

交叉反應(yīng)物的抗原抗體應(yīng)分別進(jìn)行驗證，建議在病原體的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗證。通常病毒最低濃度為105PFU/mL，細(xì)菌或者真菌的最低濃度為106CFU/mL，提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的病毒/樣本的來源、種屬/型別、陰陽性鑒定和濃度/滴度確認(rèn)等試驗資料。

抗體試劑建議進(jìn)行的交叉反應(yīng)病原體：Ⅰ/Ⅱ型人類嗜T細(xì)胞病毒、梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、結(jié)核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、馬爾內(nèi)菲青霉菌、人乳頭瘤病毒、人細(xì)小病毒B19。

抗原試劑建議進(jìn)行的交叉反應(yīng)病原體：甲型流感病毒、乙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、結(jié)核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、念珠菌、人乳頭瘤病毒、人細(xì)小病毒B19、風(fēng)疹病毒、馬爾內(nèi)菲青霉菌、支原體、隱球菌。

2.8.2干擾試驗

應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體/抗原為弱陽性和陰性水平的多例樣本進(jìn)行試驗，應(yīng)至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。

內(nèi)源性干擾物質(zhì)：

血液：血紅蛋白、膽紅素、血脂、類風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體（如抗核抗體、系統(tǒng)性紅斑狼瘡），異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、紅細(xì)胞壓積（全血樣本適用）。

口腔黏膜滲出液：唾液（蛋白）、漱口水、薄荷糖、食物殘渣、牙膏。

尿液：尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、尿液白細(xì)胞、紅細(xì)胞、尿酮體、尿膽原、亞硝酸鹽、葡萄糖、細(xì)菌、真菌、尿比重和pH異常樣本

外源性干擾物質(zhì)：

常見治療性藥物：主要包括抗反轉(zhuǎn)錄病毒藥物（核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、整合酶抑制劑、融合抑制劑）、抗病毒藥物（鳥苷類、阿昔洛韋、伐昔洛韋、奧司他韋等）、抗生素、抗炎鎮(zhèn)痛藥（阿司匹林、洛索洛芬、布洛芬等）、抗結(jié)核藥（利福平、異煙肼等）及其他針對機會性感染疾病的治療藥物、癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗性藥物（如激素類藥物）。

其他外源性干擾物：乙醇、咖啡因、常見及新型毒品（選擇性驗證）。

2.9高劑量鉤狀效應(yīng)

HIV-1抗體、HIV-2抗體、抗原應(yīng)分別進(jìn)行鉤狀效應(yīng)研究，須采用多份高滴度臨床樣本或重組抗原進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個梯度的稀釋液重復(fù)3～5次，對鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗證。

2.10其他需注意問題

對于使用儀器進(jìn)行結(jié)果判讀的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所有型號儀器的性能評估資料。

2.11反應(yīng)體系

反應(yīng)體系研究資料包括樣本的制備方式（采集和處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、質(zhì)控方法、結(jié)果判讀方式等。

反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述條件的最佳組合。

反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過實驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法、采樣時間點（用藥前后、刷牙前后、餐前餐后、尿液采集時間/尿段）、專用采樣工具等進(jìn)行研究。

3. 穩(wěn)定性研究

主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶（開封）穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性（如涉及）、機載穩(wěn)定性（如涉及）、運輸穩(wěn)定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準(zhǔn)品，還應(yīng)對校準(zhǔn)頻率進(jìn)行研究。申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、接受標(biāo)準(zhǔn)、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4. 陽性判斷值研究

提交對申報試劑陰性/陽性結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off）研究資料，包括具體的試驗方案、人群及樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。建立陽性判斷值的樣本選擇應(yīng)考慮不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽性及臨界值附近的樣本。申請人應(yīng)根據(jù)具體情況選擇適當(dāng)?shù)姆椒?，如受試者工作特征曲線（ROC）的分析方式，來確定合理的陽性判斷值。若試驗結(jié)果存在灰區(qū)，則應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。

如產(chǎn)品適用多個樣本類型，應(yīng)明確不同的樣本類型是否存在差異，如無差異，可采用一個樣本類型進(jìn)行陽性判斷值確定后，對其他樣本類型進(jìn)行驗證。如有差異，應(yīng)分別進(jìn)行陽性判斷值的確定。

5. 其他資料

5.1主要原材料研究資料

此類產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品和企業(yè)參考品等。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)的制備、鑒定和質(zhì)量控制過程，其制備工藝必須相對穩(wěn)定;如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、選定的供應(yīng)商名稱，供應(yīng)商提供的原材料檢驗報告（質(zhì)量證書），以及該原材料到貨后的入廠檢驗報告，供應(yīng)商應(yīng)為原材料的生產(chǎn)商，不得隨意更換。申請人應(yīng)對各主要原材料均明確質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

5.1.1人類免疫缺陷病毒抗原

應(yīng)注重抗原表位的選擇，詳述選擇該抗原的依據(jù)及過程。詳細(xì)描述抗原的名稱，生物學(xué)來源、供應(yīng)商、天然/重組表達(dá)信息，提交抗原制備、純化、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。

5.1.2人類免疫缺陷病毒抗體

抗體的選擇依據(jù)及過程，提交抗體名稱、生物學(xué)來源、免疫原、克隆號及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。

5.1.3質(zhì)控線/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品

免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置質(zhì)控線，詳述質(zhì)控線相關(guān)原材料（例如羊抗鼠IgG多克隆抗體）的選擇依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平。陽性質(zhì)控品/校準(zhǔn)品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽性樣本/重組抗原/人源化抗體等;陰性質(zhì)控品/校準(zhǔn)品建議選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)。提交相關(guān)原料的來源、選擇和陰、陽性確認(rèn)、溯源等相關(guān)研究資料。企業(yè)應(yīng)對質(zhì)控品的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

5.1.4其他主要原材料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原輔料，如膠體金、標(biāo)記物（如辣根過氧化物酶等）、發(fā)光底物（如吖啶酯等）、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒等，均應(yīng)進(jìn)行驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原輔料的供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗證去除效果。

5.1.5企業(yè)參考品

企業(yè)參考品是保證產(chǎn)品性能穩(wěn)定的重要構(gòu)成之一。應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應(yīng)與待測樣本相同，對于口腔黏膜滲出液和尿液，如難以獲得大量待測樣本基質(zhì)或樣本穩(wěn)定性差，可選擇模擬基質(zhì)。企業(yè)參考品的設(shè)置應(yīng)至少包括：陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復(fù)性參考品。

對于同時檢測抗原和抗體的試劑，企業(yè)參考品需對抗原和抗體分別設(shè)置。

抗體企業(yè)參考品應(yīng)選擇不同來源的臨床樣本，其中O組、2型如難以獲得臨床樣本可選擇商業(yè)參考盤或免疫制備抗體。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設(shè)置不同滴度水平，應(yīng)覆蓋申報產(chǎn)品聲稱可檢出的主要亞型，至少包括M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、O組（如聲稱）、2型（如聲稱）。陰性參考品應(yīng)可評價產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見內(nèi)源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體抗體（如梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、結(jié)核桿菌）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應(yīng)包含最低檢測限水平，驗證型別與陽性參考品相同。重復(fù)性參考品可設(shè)置1型、2型（如聲稱）各至少兩個水平的陽性樣本，包括最低檢測限附近濃度。

抗原企業(yè)參考品可選擇不同來源的臨床樣本、病毒培養(yǎng)物、商業(yè)參考盤或重組抗原等。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設(shè)置不同滴度水平，驗證型別應(yīng)與抗體陽性參考品相同。陰性參考品應(yīng)可評價產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見內(nèi)源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體（如乙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應(yīng)包含最低檢測限水平，驗證型別應(yīng)與陽性參考品相同。重復(fù)性參考品可設(shè)置1型、2型（如聲稱）各至少兩個水平樣本，包括最低檢測限附近濃度。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

5.2.2主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

5.2.3包被/標(biāo)記工藝研究，申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。

5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

5.2.5詳細(xì)描述為消除干擾影響、降低假陽性率等采取的特殊工藝處理（如表面活性劑的選擇），提交相應(yīng)研究資料。

（四）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點關(guān)注以下內(nèi)容。

1.【預(yù)期用途】

1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清/血漿/全血……樣本中的人類免疫缺陷病毒（如P24）抗原和（HIV-1/2 M/O組）抗體。

1.2結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，用于人類免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。

1.3臨床背景描述：簡單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)及相關(guān)疾病等。簡要介紹現(xiàn)有的HIV臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。

2.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：

2.1樣本采集：明確采集時間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿、全血樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。

2.2樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復(fù)室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。如需專用采樣工具應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)說明。

3.【檢驗方法】

詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟：

3.1實驗環(huán)境：實驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器波長等。

3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應(yīng)強調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。

3.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。

4.【陽性判斷值】說明陽性判斷值，并簡要說明陽性判斷值確定的試驗方法。如陽性判斷值需進(jìn)行計算確定，詳細(xì)描述具體計算方法。

5.【檢驗結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品以及樣本的檢測結(jié)果，對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋進(jìn)行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結(jié)果。

對于檢測試劑應(yīng)明確試驗無反應(yīng)，報告為“HIV抗體陰性”。試驗有反應(yīng)，必須進(jìn)行復(fù)檢（使用原有試劑雙孔/雙份檢測或使用原有試劑加另一種試劑檢測）：兩次均無反應(yīng)，報告為“HIV抗體陰性”;兩次均有反應(yīng)，或一個有反應(yīng)一個無反應(yīng)，需進(jìn)一步進(jìn)行“補充試驗”。

檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)以陽性判斷值的研究結(jié)論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應(yīng)在此項下引用，相應(yīng)檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)符合相關(guān)指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。

6.【檢驗方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，建議包括以下內(nèi)容：

6.1 本試劑盒的檢測結(jié)果不得作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

6.2不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、處理及不當(dāng)?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。

6.3感染初期或艾滋病晚期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結(jié)果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.4評價血清學(xué)檢測結(jié)果時需要結(jié)合患者的臨床病程、基礎(chǔ)狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價值有限。

6.5如疑似窗口期感染，建議依據(jù)全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范進(jìn)行后續(xù)驗證。。

6.6 HIV-1 p24抗原試驗有反應(yīng)的樣本，必須經(jīng)過確證以后才能判斷陽性或陰性。

6.7 HIV-1 p24抗原陽性僅作為HIV感染的輔助診斷依據(jù);HIV-1 p24抗原陰性結(jié)果不能排除HIV感染。

7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

根據(jù)產(chǎn)品性能評估資料，詳述以下性能指標(biāo)：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、分析特異性（交叉反應(yīng)和干擾試驗）、鉤狀（HOOK）效應(yīng)。介紹所用樣本背景信息、數(shù)量、濃度，評價方法及檢測結(jié)果。

8.【注意事項】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

8.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內(nèi)對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項目的檢測，結(jié)果為陰性，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.2全血、血漿的運送應(yīng)符合生物安全要求，參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》。

三、參考文獻(xiàn)

[1]體外診斷試劑注冊與備案管理辦法（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）[Z].

[2]關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）[Z].

[3]體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第17號）[Z].

[4]WS -293-2019,艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn) [S].

[5]中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會艾滋病丙型肝炎學(xué)組中國疾病預(yù)防控制中心,中國艾滋病診療指南[J],中國艾滋病性病,2021.

[6]中國疾病預(yù)防控制中心.全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范[Z].2020.