附件：抗繆勒管激素測定試劑注冊審查指導原則（2021年第104號）.doc

抗繆勒管激素測定試劑注冊審查指導原則

本指導原則旨在指導注冊申請人對抗繆勒管激素測定試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導原則是對抗繆勒管激素測定試劑的一般要求，申請人應依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導原則是供注冊申請人和審查人員使用的指導文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應提供詳細的研究資料和驗證資料。應在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標準體系的不斷完善和科學技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

抗繆勒管激素測定試劑用于體外定量檢測人血清、血漿等樣本中抗繆勒管激素（Anti-Müllerian Hormone，AMH）的含量。本指導原則適用于以酶標記、（電）化學發(fā)光標記等標記方法為標記抗體，以微孔板、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等為載體包被抗體，定量檢測AMH的免疫分析試劑，不適用于免疫層析法、用放射性同位素標記的各類放射免疫或免疫放射檢測試劑以及申請單獨注冊的抗繆勒管激素校準品和質(zhì)控品，但適用處可參照執(zhí)行。

依據(jù)相關(guān)規(guī)定，抗繆勒管激素測定試劑管理類別為Ⅱ類醫(yī)療器械，分類編碼為6840。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應與所采用的方法學一致，如抗繆勒管激素測定試劑盒（磁微粒化學發(fā)光法）。分類編碼：6840。

2.注冊單元劃分

應符合《醫(yī)療器械注冊單元劃分指導原則》中體外診斷試劑注冊單元劃分相關(guān)要求。

3.產(chǎn)品列表

以表格形式列出擬申報產(chǎn)品的包裝規(guī)格、主要組成成分，以及每個包裝規(guī)格的標識（如貨號、器械唯一標識等）和描述說明。

4.主文檔授權(quán)信

如適用，申請人應當對主文檔引用的情況進行說明。申請人應當提交由主文檔所有者或其備案代理機構(gòu)出具的授權(quán)申請人引用主文檔信息的授權(quán)信。授權(quán)信中應當包括引用主文檔的申請人信息、產(chǎn)品名稱、已備案的主文檔編號、授權(quán)引用的主文檔頁碼/章節(jié)信息等內(nèi)容。

5.既往溝通記錄

在產(chǎn)品申報前，如果申請人與監(jiān)管機構(gòu)針對申報產(chǎn)品以會議形式進行了溝通，或者申報產(chǎn)品與既往注冊申報相關(guān)。應當提供相關(guān)內(nèi)容（如適用）。

如不適用，應當明確聲明申報產(chǎn)品沒有既往申報和/或申報前溝通。

（二）非臨床資料

1.產(chǎn)品風險管理資料

申請人應考慮產(chǎn)品生命周期的各個環(huán)節(jié)，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預見的危害等方面的判定以及對患者風險的估計進行風險分析、風險評價和相應的風險控制。（參考YY/T 0316《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用》）

以下依據(jù)YY/T 0316的附錄E和附錄H從五個方面提示性列舉了試劑盒可能存在的危害因素，提示審查人員可從以下方面考慮。

2.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

2.1產(chǎn)品技術(shù)要求

應當根據(jù)分析性能評估的結(jié)果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻資料，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導原則》的規(guī)定編制。

作為定量檢測試劑盒，產(chǎn)品技術(shù)要求應主要包括以下性能指標：外觀、裝量（如適用）、檢出限、準確度、線性區(qū)間、精密度（重復性、批間差）、穩(wěn)定性等。申請人應根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計、技術(shù)原理和臨床意義，科學合理地進行量值溯源或者設(shè)置企業(yè)參考品。

如注冊單元中包含校準品或質(zhì)控品，其性能指標的檢驗方法應在技術(shù)要求中予以描述。應包括但不限于外觀、裝量（如適用）、正確度、均勻性（瓶內(nèi)均勻性、瓶間均勻性）、校準品溯源性等。凍干型校準品和質(zhì)控品還應檢測水分含量和復溶穩(wěn)定性。如該類產(chǎn)品發(fā)布了行業(yè)標準，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應不低于行業(yè)標準的要求。

2.2產(chǎn)品檢驗報告

根據(jù)《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式》的要求，可提供申請人出具的自檢報告或委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的檢驗報告。申請人應在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系的相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進行檢驗。如有相應的國家法規(guī)發(fā)布或更新，按其要求執(zhí)行。

3.分析性能評估資料

申請人應提交對試劑進行的所有分析性能評估的研究資料。分析性能評估用產(chǎn)品應為原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過選擇和確定后，在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的產(chǎn)品。分析性能評估時最好將試劑和所選用的校準品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。具體研究方法建議參照國內(nèi)外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品分析性能評估的文件進行。

分析性能評估應包括但不限于空白限、檢出限與定量限、正確度、線性區(qū)間與可報告區(qū)間、精密度、分析特異性、鉤狀效應（如適用）等。

對于以下每項分析性能的評估都應包括具體研究方法、研究方法選擇的理由、可接受標準、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析、提供證據(jù)的總結(jié)以及證據(jù)充分性的論證或者此項研究不適用的說明等詳細資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應在申報資料中有所體現(xiàn)，包括試驗地點、適用儀器、試劑規(guī)格、批號、臨床樣本來源等：

3.1空白限、檢出限與定量限

試劑的檢出能力應包括空白限（LoB）、檢出限（LoD）與定量限（LoQ），是評估該試劑測量區(qū)間下限的指標。LoB總是低于LoD，而LoD則低于或等于LoQ。

3.2正確度

對測量正確度的評價包括：使用參考物質(zhì)的正確度評價、方法學比對、回收試驗等方法，申請人可根據(jù)實際情況選擇以下方法的一項或幾項進行研究。

3.2.1使用參考物質(zhì)的正確度評價

將具有互換性的有證參考物質(zhì)/公認的參考品、標準品或參考測量程序賦值的臨床樣本作為樣品分別按照待測試劑盒說明書的步驟進行檢測，每個樣品分別重復檢測3次，取測試結(jié)果記為（Xi），按公式（參考YY/T 1589）分別計算相對偏差（Bi）。如果3次結(jié)果都符合要求，即判為合格。如果大于等于2次的結(jié)果不合格，即判為不合格。如果有1次結(jié)果不符合要求，則應重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式計算相對偏差，如果大于等于19次測試的結(jié)果符合要求，則正確度符合企業(yè)規(guī)定要求。

注：不可采用產(chǎn)品校準品、申報試劑檢測系統(tǒng)定值的質(zhì)控品進行正確度評價。

3.2.2方法學比對

采用參考測量程序或國內(nèi)/國際普遍認為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為比較測量程序，與擬申報試劑同時檢測一批臨床樣品（至少40例樣本），臨床樣本的濃度水平應覆蓋申報試劑的測量區(qū)間并盡量均勻分布，從測定結(jié)果間的差異估計擬申報試劑與比較測量程序間的偏倚。

用線性回歸方法對兩組結(jié)果進行線性擬合，得到線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)（r）和斜率;在醫(yī)學決定水平處，利用回歸方程計算預期偏差。

在實施方法學比對前，應分別對擬申報試劑和比對試劑進行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標準后方可進行方法學比對。方法學比對時應注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學分析。

3.2.3 回收試驗

將標準溶液/高濃度參考物質(zhì)或分析物純品加入臨床樣本中，配制成回收樣品，進行檢測。標準溶液/高濃度參考物質(zhì)的體積與臨床樣本的體積比應不會產(chǎn)生基質(zhì)的變化，一般加入體積不超過總體積的10%。

檢測至少三個水平的回收樣品，代表試劑測量區(qū)間內(nèi)的高、中、低濃度，其中一份回收樣品的濃度應在醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限附近。每個濃度應進行多次重復檢測。

按公式（參考YY/T 1589）計算回收率，建議回收率應在85%～115%范圍內(nèi)。

3.3測量范圍

3.3.1 線性區(qū)間

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應與臨床試驗樣本相似，但不可采用含有對測定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本。理想的樣本為分析物濃度接近預期測定上限的人血清（或其他等效基質(zhì)），且應充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

建立線性區(qū)間需在預期測定范圍內(nèi)選擇7～11個濃度的樣本（建議用高值和低值濃度的樣本按比例精確配制），可比預期的線性區(qū)間寬20%～30%，每個濃度樣本檢測2～4次。采用合理的統(tǒng)計方法結(jié)合圖示評價檢測結(jié)果是否呈線性，逐漸減少濃度點，直到有可接受的線性區(qū)間。統(tǒng)計方法建議采用多項式回歸分析，對回歸方程進行線性檢驗，需要時進行非線性程度判斷。建議納入重復性的檢查，并設(shè)置合理的接受標準。

驗證線性區(qū)間需采用5到9個不同濃度的樣本，覆蓋整個線性區(qū)間，每個濃度樣本檢測至少2次。統(tǒng)計方法可采用多項式回歸分析，或直線擬合后分析線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及偏差的方法。

3.3.2 可報告區(qū)間

如對超出線性區(qū)間的濃度樣本可進行稀釋后檢測，應研究適用的稀釋液和聲稱的稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的可報告區(qū)間。

3.4精密度

精密度的評價包括重復性、中間精密度和再現(xiàn)性內(nèi)容，評價時充分考慮影響精密度的條件：如操作者、測量儀器、測量程序、試劑批次（lot）、校準（校準品批次，校準周期）、運行（run）、時間、地點、環(huán)境條件（實驗室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等。

精密度研究用樣本一般為臨床實際檢測樣本或其混合物，必要時可進行稀釋、添加或采用基質(zhì)合理的質(zhì)控品。樣本濃度一般包括測量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的3～5個水平，應有醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限濃度附近的樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點檢測，應確保樣本的穩(wěn)定性和一致性，可將樣本等分保存。

3.5分析特異性

3.5.1交叉反應：對易產(chǎn)生交叉反應的其他抗原、抗體等進行驗證，如促黃體生成素（LH）、抑制素A、抑制素B、激活素A、激活素B、激活素AB、促卵泡生成激素（FSH）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）等，交叉反應驗證物質(zhì)的濃度應涵蓋人體生理及病理狀態(tài)下及臨床治療過程中可能出現(xiàn)的最高濃度值。

3.5.2干擾物質(zhì)

3.5.2.1內(nèi)源性干擾物的影響

樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，如血紅蛋白、膽固醇、脂肪乳、甘油三酯、膽紅素、類風濕因子、抗核抗體（ANA）、抗人抗鼠抗體（HAMA）以及說明書中聲稱其他的干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響。干擾物濃度的分布應覆蓋人體樣本生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。

如無法獲得含有高濃度干擾物質(zhì)的樣本，可采用純品物質(zhì)分別添加到健康人樣本、醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限附近樣本的方式進行驗證，建議采用至少兩個分析物水平的樣本。方法為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學意義，說明樣本的制備方法及干擾試驗的評價標準，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度。

3.5.2.2外源性干擾物的影響

抗凝劑的影響，如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應采用適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進行對比試驗研究。方法為對比線性范圍內(nèi)的同一病人的血清和血漿樣本（每種抗凝劑樣本至少20例），應包含醫(yī)學決定水平或參考區(qū)間上、下限附近樣本進行檢測以驗證申報試劑對于血清和血漿樣本檢測結(jié)果的一致性。

常用藥物的干擾，如氨芐西林、抗壞血酸、乙酰水楊酸、對乙酰氨基酚、可待因、布洛芬等。

3.5.2資料中所提到的干擾物質(zhì)，其干擾程度均不應使用模糊的描述方式，而應細化到干擾量，并提供相應的試驗數(shù)據(jù)予以支持。申請人應根據(jù)產(chǎn)品特點選擇潛在的干擾物質(zhì)進行驗證。

研究結(jié)果建議在說明書中進行說明。

3.6 鉤狀效應（如適用）

說明不會產(chǎn)生鉤狀效應的濃度上限或相關(guān)研究，如需稀釋，應注明對稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。每個濃度重復3份，對鉤狀效應進行合理的驗證。建議在產(chǎn)品說明書上明示對鉤狀效應的研究結(jié)果。

過度稀釋可能影響樣本基質(zhì)，研究過程應注意基質(zhì)效應影響，必要時應提供基質(zhì)效應研究有關(guān)的資料。

3.7校準品和質(zhì)控品的性能指標（如適用）

根據(jù)相關(guān)標準，提供企業(yè)工作校準品及試劑盒配套校準品的來源、賦值過程以及測量不確定度相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料。如有國家（國際）標準品，試劑盒配套校準品應根據(jù)相關(guān)標準的要求溯源至國家（國際）標準品，也可自行建立溯源體系。如校準品或質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床適用樣本類型，還應提交基質(zhì)效應的相關(guān)研究資料。（參考GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量 校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性》）

3.8其它需注意問題

3.8.1對于適用多個機型的產(chǎn)品，應提供在所有適用型號儀器上進行的性能驗證資料。

3.8.2若產(chǎn)品涉及不同包裝規(guī)格且不同包裝規(guī)格間存在性能差異，則需要提供每個包裝規(guī)格在不同型號儀器上的評估資料;如不存在性能差異，需要詳細說明不同規(guī)格間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

4.穩(wěn)定性研究資料

4.1試劑穩(wěn)定性

試劑穩(wěn)定性主要包括實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性、機載穩(wěn)定性等研究，如組分為凍干粉，應有復溶穩(wěn)定性研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。如產(chǎn)品包含校準品和質(zhì)控品，應提供相應穩(wěn)定性試驗研究資料。

試劑穩(wěn)定性的研究結(jié)果應在說明書【儲存條件及有效期】中進行詳細說明。

4.2樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性主要包括室溫、冷藏、冷凍條件下的有效性驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點（溫度范圍），每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行穩(wěn)定性驗證，從而確認不同類型樣本的保存穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應對凍融次數(shù)進行評價。

樣本穩(wěn)定性的研究結(jié)果應在說明書【樣本要求】中進行詳細說明。

5.參考區(qū)間確定資料

應提交參考區(qū)間建立或驗證時所采用樣本來源及詳細的試驗資料。應明確參考人群的篩選標準，應對性別及女性不同年齡段進行分組研究，例數(shù)應符合統(tǒng)計學要求。（建議參考CLSI 或WS/T等相關(guān)文件進行研究。）

參考值研究結(jié)果應在說明書【參考區(qū)間】項中進行相應說明。

6.其他

6.1主要原材料研究資料（如需提供）

應提供主要原材料如抗原-抗體、酶、信號標記物、固相載體等的來源、選擇、制備方法的研究資料及其質(zhì)量標準的制訂資料、評價結(jié)果和質(zhì)量分析證書（COA），并詳細描述原材料的技術(shù)指標和驗收標準。主要原材料的研究資料具體要求如下：

6.1.1抗體的選擇及質(zhì)量標準

明確抗體的生物學來源，提供抗體純度、效價、功能性試驗等詳細試驗資料。

抗體如為自行生產(chǎn)，提供抗體的詳細生產(chǎn)及鑒定過程。

6.1.2校準品（如適用）和質(zhì)控品（如適用）的原料選擇、制備、定值試驗資料。

6.1.3申請人應根據(jù)相關(guān)標準提供所用校準品的來源、明確校準品的質(zhì)量標準、賦值過程和相應指標以及不確定度等內(nèi)容，并提供校準品的溯源性文件（如適用）。（參考GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量 校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性》）

6.2主要生產(chǎn)工藝及反應體系的研究資料（如需提供）

應包括以下內(nèi)容：

6.2.1主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并標明關(guān)鍵工藝質(zhì)控步驟，簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

6.2.2產(chǎn)品反應原理介紹。

6.2.3抗體包被工藝研究：申請人應考慮如包被抗體濃度、包被緩沖液種類及添加量（如適用）、包被時間等工藝參數(shù)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標的最佳組合。

6.2.4抗體標記工藝研究：申請人應考慮標記抗體的濃度、標記比例等內(nèi)容。

6.2.5反應條件確定：申請人應考慮反應模式、反應時間、反應溫度、洗滌次數(shù)（如適用）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。

6.2.6不同適用機型的反應條件如果有差異應分別詳述。

6.2.7體系中樣本及試劑的加樣方式及添加量確定：申請人應考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過試驗確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進行研究，通過研究結(jié)果確定樣本稀釋基質(zhì)或處理方法。確定反應所需其他試劑用量的研究資料。

6.2.8固相載體、信號放2大系統(tǒng)、顯色（發(fā)光）系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹及研究資料。

（三）臨床評價資料

臨床試驗總體要求及臨床試驗資料的內(nèi)容應符合《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式》和《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》臨床研究資料有關(guān)的規(guī)定，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應符合更新后的要求。下面僅對臨床試驗中的基本問題進行闡述。

1.臨床試驗研究方法

選擇境內(nèi)已批準上市、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用擬申報產(chǎn)品（以下稱考核試劑）與之進行同步盲法對比試驗，證明本品與已上市產(chǎn)品的一致性。對比試劑在預期用途、適用人群、樣本類型、檢測性能等方面應與試驗用體外診斷試劑具有較好的可比性。

2.臨床試驗機構(gòu)的選擇

2.1第二類產(chǎn)品申請人應當選定不少于2家（含2家）符合要求的臨床試驗機構(gòu)開展臨床2試驗。

2.2臨床試驗機構(gòu)應當具備臨床試驗所需的專業(yè)技術(shù)水平、組織管理能力、倫理審查能力以及與所開展臨床試驗相適應的試驗條件、設(shè)施設(shè)備等。針對本產(chǎn)品的特點，還應當特別注意臨床試驗機構(gòu)日常診療工作中患者的性別及年齡分布。

臨床試驗研究者和參與臨床試驗的人員應具有設(shè)計并實施相關(guān)臨床試驗的能力、熟悉相關(guān)檢測技術(shù)、能夠?qū)z測結(jié)果進行正確判讀。臨床試驗統(tǒng)計學負責人應為有相關(guān)專業(yè)背景和專業(yè)能力的從業(yè)人員。

臨床試驗研究者應了解必要的臨床試驗法規(guī)要求。臨床試驗機構(gòu)應能夠確保相關(guān)臨床試驗嚴格按照預定方案實施，并能夠配合產(chǎn)品注冊申報過程，包括進行必要的補充試驗、配合臨床試驗真實性核查等。

3.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應從流行病學、臨床醫(yī)學、檢驗醫(yī)學、統(tǒng)計學等多方面考慮，設(shè)計科學合理的臨床研究方案。各臨床試驗機構(gòu)的方案設(shè)置應一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應在臨床試驗機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導外，不得隨意干涉試驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經(jīng)入選的病例再被剔除出臨床研究都應記錄在案并明確說明原因。在試驗操作及讀數(shù)過程中應采用盲法及樣本隨機分配以保證試驗結(jié)果的客觀性。試驗方案中還應明確兩種試劑檢測結(jié)果相關(guān)性的判定標準。另外，入組的樣本類型應當同時符合考核試劑及對比試劑的要求。

4.研究對象選擇

4.1臨床試驗應選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。企業(yè)在建立病例納入標準時，應考慮到人群中不同年齡、性別等的差異。在進行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群進行分層分析。

4.2總體樣本數(shù)不少于200例，在報告范圍內(nèi)的各個濃度水平均應有一定量的樣本例數(shù)，并2著重考慮對醫(yī)學決定水平的檢測性能進行充分驗證。

如果考核試劑同時適用于血清和血漿樣本類型，可完成一個樣本類型不少于200例的臨床研究。同時驗證其中至少100例受試者的自身血清、血漿樣本測試結(jié)果間的一致性（采用考核試劑檢測），樣本濃度的分布應與總體樣本的分布情況一致。

對于不具有可比性的樣本類型，每種樣本類型臨床試驗的總樣本數(shù)至少為200例。

4.3各臨床試驗機構(gòu)樣本量和受試者基線特征分布應相對均衡。

4.4應明確臨床樣本的采集要求。

4.4.1應明確抗凝劑的要求（如適用），對檢測結(jié)果有明顯干擾作用的樣本，如高脂、溶血、黃疸的樣本盡量避免使用。建議在臨床試驗中選擇部分易產(chǎn)生2交叉反應的樣本，從臨床角度驗證試劑的特異性。

4.4.2試驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無法避免使用貯存樣品時，注明貯存條件及時間，在數(shù)據(jù)分析時應考慮其影響。另外需要關(guān)注對比試劑說明書中對樣本的相關(guān)要求，臨床試驗用的樣本需同時滿足考核試劑和對比試劑的相關(guān)要求。

5.倫理學要求

臨床試驗必須符合赫爾辛基宣言的倫理學準則，必須獲得臨床試驗機構(gòu)倫理委員會的同意。研究者應考慮臨床試驗用樣本的獲得和試驗結(jié)果對受試者的風險2性，應提交倫理委員會的審查意見及受試者的知情同意書。對于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗對受試者幾乎沒有風險，可經(jīng)倫理委員會審查和批準后免于受試者的知情同意。

6.統(tǒng)計學分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應選擇合適的統(tǒng)計方法。對于比對試驗的一致性研究，最常用是對考核試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)性分析，用相關(guān)性分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，考核試劑與對比試劑定量值結(jié)果應具有相關(guān)性。同時，采用Bland-Altman法，通過計算一致性限度，評價兩種檢測結(jié)果的一致性。一致性限度應在臨床所能接受的界值范圍內(nèi)。

結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學負責人選擇合理的統(tǒng)計學方法進行分析，統(tǒng)計分析應可以證明兩種方法的檢測結(jié)果是否存在明顯統(tǒng)計學差異。

7.結(jié)果差異樣本的驗證

在數(shù)據(jù)收集過程中，對于兩種試劑的檢測結(jié)果有明顯差異的樣本，應采用“金標準”或其他合理的方法進行復核，以便對臨床試驗結(jié)果進行分析。如無需復核，應詳細說明理由。

8.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則的通告》的要求，臨床試驗報告應該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。

9.討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床試驗有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。

（四）產(chǎn)品說明書和標簽樣稿

說明書承載了產(chǎn)品預期用途、檢驗原理、檢驗方法、檢驗結(jié)果解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，則應以規(guī)范格式對此內(nèi)容進行標注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。最小銷售單元標簽樣稿內(nèi)容應當符合相關(guān)法規(guī)、規(guī)章、規(guī)范性文件、強制性標準的要求。

以下內(nèi)容僅對抗繆勒管激素檢測試劑說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明，說明書其他內(nèi)容應根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》要求進行編寫。

產(chǎn)品說明書內(nèi)容原則上應全部用中文進行表述;如含有國際通用或行業(yè)內(nèi)普遍認可的英文縮寫，可用括號在中文后標明;對于確實無適當中文表述的詞語，可使用相應英文或其縮寫。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：試劑（盒）名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。檢驗的方法或者原理應明確到細分的具體方法學。如：抗繆勒管激素測定試劑（磁微?；瘜W發(fā)光法）。

名稱中不應當出現(xiàn)定性/定量等內(nèi)容。

2.【包裝規(guī)格】

（1）應與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格及型號一致。

（2）注明裝量或可測試的樣本數(shù)，如××測試/盒、××mL。

（3）如不同包裝規(guī)格有與之特定對應的機型，應同時明確適用機型。

3.【預期用途】

3.1試劑盒用于體外定量檢測人×××樣本中的抗繆勒管激素。其中，×××應寫明適用的樣本類型為血清、血漿等，上述內(nèi)容均應有相應的分析性能評估資料和（或）臨床評價資料支持。

3.2與預期用途相關(guān)的臨床適應癥背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。

4.【檢驗原理】

應結(jié)合產(chǎn)品主要成分詳細說明檢驗原理、方法，必要時可采用圖示方法描述。

5.【主要組成成分】

5.1說明試劑盒包含組成、數(shù)量、濃度或含量等信息。

5.2建議對所包被和標記的抗體生物學來源進行簡單介紹。

5.3對于校準品和質(zhì)控品（如適用）：

5.3.1注明校準品的生物學來源、定值及其溯源性，溯源性資料應寫明溯源的最高級別（應包括標準物質(zhì)或參考方法的發(fā)布單位及編號）。

5.3.2應明確說明質(zhì)控品的生物學來源、及其他特性，應明確靶值范圍（如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單）。

5.4對于多組分試劑應明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換，如可互換，則需提供相應的性能驗證資料。

5.5對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗必需的試劑組分，說明書中應列出此類試劑的名稱、提供混合或稀釋等方法及其他相關(guān)信息。

6.【儲存條件及有效期】

6.1對試劑的實時穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性（如適用）、復溶穩(wěn)定性（如適用）、凍融次數(shù)限制（如適用）等信息作詳細介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。

6.2不同組分保存條件及有效期不同時，應分別說明，產(chǎn)品總有效期以其中效期最短的為準。

注：保存條件不應有模糊表述，如“常溫”、“室溫”。

6.3生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期見標簽

7.【適用儀器】

說明可適用的儀器及型號，應寫明具體適用儀器的型號，不能泛指某一系列儀器。適用儀器需寫明廠家及型號。

8.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：

8.1明確本產(chǎn)品適用的樣本類型，血液樣本應當說明對采血管及抗凝劑的要求，其他樣本應說明樣本采集、處理及保存方式。

8.2樣本采集：采集時間點是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，盡量減少由于樣本采集或處理不當對試驗造成的影響。

8.3樣本處理、運送及保存：明確樣本處理方法、樣本的保存條件及期限等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復室溫，凍融次數(shù)的要求。

8.4應與樣本穩(wěn)定性的研究一致。

9.【檢驗方法】詳細說明試驗操作的各個步驟

9.1試驗環(huán)境：溫、濕度條件及試劑復溫等要求。

9.2試劑使用方法、注意事項，試劑開封后注意事項等。

9.3明確樣本檢測的操作步驟。

9.4校準：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線的繪制方法。對適用于具有校準曲線保存功能檢測儀器的產(chǎn)品，應注明校準周期。

9.5質(zhì)量控制：明確質(zhì)控品的選擇、質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等;建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控失控時，應分析原因并采取糾正措施。

9.6結(jié)果計算：對于手工/半自動儀器，說明校準曲線擬合方式及結(jié)果計算方法。

10.【參考區(qū)間】

應按照不同性別及女性年齡段，分別說明常用樣本類型的參考區(qū)間，并簡要說明參考區(qū)間的確定方法包括樣本情況（入選人群）、試驗方法、統(tǒng)計方法等。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】

應對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進行合理的解釋。

11.1分析異常值出現(xiàn)的可能因素，明確說明何種情況下需要進行重復檢測，以及在重復檢測時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進行詳述。

11.2超出檢測范圍的樣本怎樣報告結(jié)果，如要得到準確的結(jié)果需怎樣處理，如需稀釋，應注明稀釋方法、最佳或最大稀釋比例等。

12.【檢驗方法局限性】至少應包括以下內(nèi)容：

12.1干擾物質(zhì)及鉤狀效應（如適用）對檢測結(jié)果的影響。明確干擾物對測定的影響，同時列出干擾物的具體濃度，不應使用模糊的描述方式。明示出現(xiàn)鉤狀效應時抗繆勒管激素的最低濃度，或濃度達到一定數(shù)值時未發(fā)生鉤狀效應。

12.2有關(guān)假性升高或降低結(jié)果的可能性分析。

12.3抗凝劑對檢測結(jié)果的影響（如適用）。

12.4本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，不得作為患者病情評價的唯一指標，對患者的臨床診治應結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

13.【產(chǎn)品性能指標】詳述以下性能指標：

至少應包括：檢出限、準確度、線性、精密度（重復性、批間差）。

臨床試驗結(jié)果：簡要介紹參比試劑（方法）的信息、所采用的統(tǒng)計學方法及統(tǒng)計分析結(jié)果。

【注意事項】應至少包括以下內(nèi)容：

14.1有關(guān)試驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。

14.2采用不同廠家及不同方法學的試劑檢測所得結(jié)果不應直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學解釋，建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告中注明所用試劑特征（如參考區(qū)間或方法學）。

14.3有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)質(zhì)控品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HIV、HBV、HCV等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。提示對于潛在傳染源的處理方式。

14.4使用不同生產(chǎn)商的試劑盒對同一份樣本進行檢測可能會存在差異。

14.5對所有樣本和反應廢棄物都視為傳染源進行處理。

14.6對于動物源性組分，應給出具有潛在感染性的警告。

14.7注明本品僅用于體外診斷。

15.【標識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義（參考YY/T0466.1），如沒有，本項可以缺省。

16.【參考文獻】

注明引用的參考文獻，并在說明書相應內(nèi)容處標注參考文獻編號。參考文獻的格式參考論文規(guī)范要求。

17.【基本信息】

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導原則的通告》的要求編寫。

（五）質(zhì)量管理體系文件

包括生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責程序、資源管理程序、產(chǎn)品實現(xiàn)程序、質(zhì)量管理體系的測量、分析和改進程序、其他質(zhì)量體系程序信息以及質(zhì)量管理體系核查文件。

三、參考文獻

[1]GB/T 21415，體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性[S].

[2]YY/T 0466.1，醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標簽、標記和提供信息的符號第1部分：通用要求[S].

[3]YY/T 0316，醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用[S].

[4][5]YY/T 1579，體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評價[S].

[5]馮仁豐.臨床檢驗質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)[M].上?？茖W技術(shù)文獻出版社,2007.

[6]尚紅,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].人民衛(wèi)生出版社,2015.

四、編寫單位

編寫單位：重慶市醫(yī)療器械技術(shù)審評認證中心。

參與單位：廣東省藥品監(jiān)督管理局審批認證中心
　　　　　　　北京市醫(yī)療器械技術(shù)審評中心