做體外診斷試劑臨床試驗(yàn)，大家經(jīng)常會(huì)問(wèn)：說(shuō)明書(shū)里“特異性”那一項(xiàng)列了好多可能的干擾物質(zhì)，做臨床時(shí)是不是每一種都得找對(duì)應(yīng)的病人樣本測(cè)一遍？要是有些干擾物質(zhì)特別少見(jiàn)，病人不好找，能不能在實(shí)驗(yàn)室（臨床前研究）里驗(yàn)證過(guò)關(guān)了，臨床就不管它了？這個(gè)問(wèn)題關(guān)系到臨床試驗(yàn)怎么設(shè)計(jì)，工作量有多大，也關(guān)系到產(chǎn)品能不能順利獲批。咱們就詳細(xì)說(shuō)說(shuō)這事兒，看看法規(guī)和實(shí)際操作是怎么要求的。

干擾樣本入組的要求

1.臨床必須納入干擾樣本嗎？答案是肯定的。 法規(guī)有明確要求。《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》說(shuō)了，選病人進(jìn)組的時(shí)候，得把那些可能影響檢測(cè)結(jié)果的干擾樣本考慮進(jìn)去。為啥呢？因?yàn)椴∪藰颖纠锷冻煞侄加?，特別復(fù)雜。干擾物質(zhì)的表現(xiàn)直接關(guān)系到你這試劑測(cè)的準(zhǔn)不準(zhǔn)，這是評(píng)價(jià)產(chǎn)品性能的關(guān)鍵一環(huán)。

2.納入哪些干擾樣本？重點(diǎn)在“常見(jiàn)”和“預(yù)期”。核心是覆蓋那些臨床上預(yù)期會(huì)碰到的、常見(jiàn)的干擾物質(zhì)。像大家熟知的膽紅素（黃疸）、血紅蛋白（溶血）、甘油三酯（乳糜血）這些，基本跑不掉，臨床樣本里經(jīng)常能碰到。國(guó)家藥監(jiān)局器審中心發(fā)布的指導(dǎo)原則也建議，優(yōu)先考慮臨床樣本里最高濃度（也就是最差情況）的干擾物來(lái)做。簡(jiǎn)單說(shuō)，病人身上容易出現(xiàn)的、濃度可能很高的干擾，臨床得測(cè)。

3.“特異性”指標(biāo)下的干擾物質(zhì)都要覆蓋嗎？不一定強(qiáng)制。 這里就是問(wèn)題的關(guān)鍵了。說(shuō)明書(shū)“特異性”性能指標(biāo)項(xiàng)下，廠家可能會(huì)列出一大堆潛在干擾物質(zhì)，包括一些不太常見(jiàn)的或者理論上存在的。臨床試驗(yàn)的重點(diǎn)在于驗(yàn)證產(chǎn)品在真實(shí)使用環(huán)境下的性能，特別是針對(duì)預(yù)期用途和預(yù)期樣本類型中的干擾。所以，并不強(qiáng)制要求臨床試驗(yàn)必須覆蓋“特異性”項(xiàng)下羅列的每一個(gè)干擾物質(zhì)。證據(jù)也指出，具體要納入哪些干擾、納入多少，并沒(méi)有一個(gè)死板的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。臨床入組更關(guān)注那些預(yù)期會(huì)遇到、可能顯著影響結(jié)果判斷的常見(jiàn)干擾物質(zhì)。一些非常見(jiàn)或者理論上存在的干擾物，其驗(yàn)證責(zé)任主要在臨床前研究。

不常見(jiàn)干擾物質(zhì)的處理

1.臨床前研究是主戰(zhàn)場(chǎng)。對(duì)于說(shuō)明書(shū)“特異性”項(xiàng)下那些不常見(jiàn)的、或者預(yù)期在常規(guī)臨床樣本中不太可能達(dá)到干擾濃度的物質(zhì)，主要的驗(yàn)證工作是在臨床前研究（分析性能評(píng)估）階段完成的。這符合邏輯，因?yàn)榕R床主要模擬真實(shí)使用環(huán)境，驗(yàn)證整體有效性；而分析性能評(píng)估則是在受控條件下，深入考察試劑對(duì)各種分析干擾因素的抵抗能力。

2.臨床前怎么驗(yàn)證？方法很關(guān)鍵。

（1）配對(duì)比對(duì)是黃金法則：基本方法就是做配對(duì)比對(duì)。拿一份基礎(chǔ)樣本，一份往里面加高濃度的可疑干擾物（模擬最差情況），然后用你的試劑去測(cè)，看看結(jié)果有沒(méi)有明顯差別。

（2）樣本濃度有講究：不能只測(cè)一個(gè)濃度點(diǎn)。得用至少兩個(gè)濃度的樣本來(lái)測(cè)，特別要包含接近臨界值（Cut-off值）的弱陽(yáng)性樣本，這很關(guān)鍵。比如測(cè)某個(gè)病，臨界值是10，那就得測(cè)濃度在10左右的樣本加了干擾物后會(huì)不會(huì)受影響。

（3）干擾物濃度要夠高：加的干擾物濃度，得是臨床上可能遇到的最高濃度，這樣才能模擬最壞情況。

（4）設(shè)定好“及格線”：得事先定好標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果差多少算有干擾，差多少算沒(méi)干擾。這叫“可接受標(biāo)準(zhǔn)”或者“驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)”。如果加了干擾物，結(jié)果變化超過(guò)了你的“及格線”，或者可能影響醫(yī)生判斷病情，那就得承認(rèn)這東西確實(shí)干擾了，還得研究干擾的程度跟濃度有啥關(guān)系。如果變化在“及格線”內(nèi)，不影響看病，那就可以說(shuō)在這個(gè)濃度下，這東西不干擾，并說(shuō)明不干擾的最高濃度是多少。

（5）可以用人工樣本：對(duì)于實(shí)在找不到天然樣本的罕見(jiàn)干擾物，法規(guī)允許用人工添加的方法來(lái)做研究。但要注意，如果干擾物本身跟你測(cè)的樣本基質(zhì)（比如血清、尿液）不一樣，添加量最好別超過(guò)總體積的5%，并且盡量用接近人體內(nèi)存在的形式（比如藥品用它的代謝物形式）。

3.臨床試驗(yàn)中對(duì)不常見(jiàn)干擾物質(zhì)的要求？可以不做硬性要求。 基于以上，對(duì)于經(jīng)過(guò)充分、科學(xué)的臨床前研究（分析性能評(píng)估）驗(yàn)證，明確證實(shí)其在預(yù)期濃度下不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生臨床顯著性影響的“不常見(jiàn)干擾物質(zhì)”，在臨床試驗(yàn)中可以不做專門要求，即不需要在臨床試驗(yàn)中刻意去尋找含有這類物質(zhì)的罕見(jiàn)樣本進(jìn)行入組。 臨床前研究的數(shù)據(jù)足以支持其安全性有效性。當(dāng)然，如果在臨床試驗(yàn)過(guò)程中偶然收集到了含有這類物質(zhì)的樣本，那分析這些樣本的結(jié)果自然也是有價(jià)值的補(bǔ)充。

注冊(cè)資料注意事項(xiàng)

1.臨床前研究數(shù)據(jù)是核心支撐。既然不常見(jiàn)干擾物質(zhì)主要靠臨床前研究來(lái)驗(yàn)證，那在注冊(cè)申報(bào)時(shí)，分析性能評(píng)估報(bào)告里關(guān)于干擾試驗(yàn)（分析特異性）的部分就非常重要了。這部分報(bào)告得詳細(xì)說(shuō)明：你研究了哪些干擾物？為什么選它們？用了什么方法（配對(duì)比對(duì)）？樣本怎么準(zhǔn)備的（濃度、基質(zhì)）？設(shè)定的“及格線”（可接受標(biāo)準(zhǔn)）是什么？有什么依據(jù)？最終結(jié)果怎么樣？對(duì)不干擾的，最高濃度是多少？對(duì)有干擾的，干擾程度和濃度啥關(guān)系？ 數(shù)據(jù)要扎實(shí)，方法要科學(xué)。

2.臨床試驗(yàn)方案和報(bào)告要體現(xiàn)對(duì)常見(jiàn)干擾的考慮。在臨床試驗(yàn)方案里，要寫(xiě)明打算怎么納入常見(jiàn)的干擾樣本（比如計(jì)劃入組多少溶血、黃疸、高脂血的樣本）。在臨床試驗(yàn)報(bào)告里，要把實(shí)際入組的干擾樣本情況（類型、數(shù)量）以及在這些樣本上的檢測(cè)結(jié)果分析清楚，證明你的試劑在真實(shí)臨床樣本中面對(duì)常見(jiàn)干擾是可靠的。

3.引用法規(guī)和指導(dǎo)原則要準(zhǔn)確。寫(xiě)注冊(cè)資料時(shí)，涉及干擾試驗(yàn)的要求，主要參考國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布的《定性檢測(cè)體外診斷試劑分析性能評(píng)估注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》、《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》等文件。免臨床的情況則要符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》的相關(guān)條款。

最后總結(jié)一下：

1.臨床試驗(yàn)必須納入樣本：做臨床試驗(yàn)，一定得想辦法把預(yù)期會(huì)遇到的、常見(jiàn)的干擾樣本（像溶血、黃疸、高脂血這些）納入進(jìn)去測(cè)試。

2.“特異性”指標(biāo)不全靠臨床：不強(qiáng)制要求臨床試驗(yàn)必須覆蓋說(shuō)明書(shū)“特異性”性能指標(biāo)項(xiàng)下羅列的每一個(gè)干擾物質(zhì)。臨床的核心是驗(yàn)證真實(shí)使用場(chǎng)景下的性能。

3.不常見(jiàn)干擾靠臨床前驗(yàn)證：對(duì)于說(shuō)明書(shū)“特異性”項(xiàng)下那些不常見(jiàn)的、預(yù)期在常規(guī)樣本中濃度低或碰不到的干擾物質(zhì)，其驗(yàn)證工作主要在 臨床前研究（分析性能評(píng)估） 階段完成。要用科學(xué)的方法（主要是配對(duì)比對(duì)，用接近臨床最高濃度的干擾物，至少測(cè)兩個(gè)分析物濃度點(diǎn)包括弱陽(yáng)性，設(shè)定合理接受標(biāo)準(zhǔn)）來(lái)證明它們的影響。

4.臨床對(duì)驗(yàn)證過(guò)的不常見(jiàn)干擾可放松：經(jīng)過(guò)充分且科學(xué)的臨床前研究驗(yàn)證，明確證實(shí)不會(huì)產(chǎn)生臨床顯著性影響的不常見(jiàn)干擾物質(zhì)，在臨床試驗(yàn)中可以不做專門要求去刻意尋找這類樣本入組。臨床前數(shù)據(jù)足夠支持了。

5.注冊(cè)資料要清楚呈現(xiàn)：交注冊(cè)資料時(shí)，臨床前研究的干擾試驗(yàn)數(shù)據(jù)要詳實(shí)、方法要合規(guī)；臨床試驗(yàn)部分要體現(xiàn)對(duì)常見(jiàn)干擾樣本的納入和結(jié)果分析。法規(guī)指導(dǎo)原則要用對(duì)。

總的來(lái)說(shuō)，體外診斷試劑干擾樣本的處理，講究個(gè)“抓大放小”。臨床重點(diǎn)抓常見(jiàn)干擾的實(shí)戰(zhàn)檢驗(yàn)；不常見(jiàn)干擾的理論風(fēng)險(xiǎn)，靠嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)室研究來(lái)排除。兩者結(jié)合，才能既滿足法規(guī)要求，又保證產(chǎn)品性能可靠，還能合理控制研發(fā)和臨床的成本與周期。思途CRO在協(xié)助客戶處理這類問(wèn)題時(shí)，也特別注重依據(jù)法規(guī)和指導(dǎo)原則，制定科學(xué)高效的驗(yàn)證策略。