附件：定性檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則（2022年第36號(hào)）.doc

定性檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則

分析性能評估資料是評價(jià)產(chǎn)品安全有效性的重要支持性資料之一?？茖W(xué)合理地開展產(chǎn)品的分析性能評估，確定產(chǎn)品的各項(xiàng)分析性能指標(biāo)，是產(chǎn)品設(shè)計(jì)開發(fā)的關(guān)鍵過程。本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對定性檢測體外診斷試劑進(jìn)行充分的分析性能評估，并整理形成注冊申報(bào)資料，同時(shí)也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對定性檢測體外診斷試劑分析性能評估的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則所述定性檢測體外診斷試劑是指僅提供兩種檢測結(jié)果（即陽性/陰性或有反應(yīng)/無反應(yīng)）的體外診斷試劑。包括：無量值報(bào)告的檢測試劑和基于量值檢測后通過閾值判斷結(jié)果的檢測試劑。本指導(dǎo)原則不適用于結(jié)果報(bào)告為陰性、1+、2+或3+的分等級(jí)報(bào)告或滴度的半定量檢測試劑和定量檢測試劑。

本指導(dǎo)原則適用于基于所有方法學(xué)的定性檢測體外診斷試劑，包括核酸擴(kuò)增技術(shù)、標(biāo)記免疫分析技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)等。

本指導(dǎo)原則適用于所有預(yù)期用途的定性檢測體外診斷試劑，包括：篩查試劑、診斷/輔助診斷試劑和確認(rèn)試劑。

本指導(dǎo)原則主要描述定性檢測體外診斷試劑分析性能評估的原則性要求，如申報(bào)產(chǎn)品已有針對性的具體指導(dǎo)原則，其分析性能評估可同時(shí)參照相應(yīng)產(chǎn)品的指導(dǎo)原則進(jìn)行。

本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品注冊和變更注冊的分析性能評估，包括申報(bào)資料中的部分要求，其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》等相關(guān)法規(guī)要求。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）分析性能評估的總體要求

1.檢測系統(tǒng)的要求

體外診斷試劑的檢測系統(tǒng)是指由樣本處理用產(chǎn)品、檢測試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、檢測設(shè)備等構(gòu)成的，可完成樣本從處理到最終結(jié)果報(bào)告所有階段的組合。應(yīng)采用完整、確定的檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析性能評估。

2.試劑要求

分析性能評估用試劑應(yīng)為原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過選擇和確定后，在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的體外診斷試劑產(chǎn)品。申請人研發(fā)實(shí)驗(yàn)室配制試劑的分析性能評估資料不作為注冊資料提交。

3.操作要求

操作者應(yīng)能正確、熟練地進(jìn)行試劑、方法及樣本相關(guān)的操作，按照產(chǎn)品說明書等相關(guān)要求進(jìn)行校準(zhǔn)和質(zhì)控程序，質(zhì)控符合要求后，按試驗(yàn)方案進(jìn)行試劑的分析性能評估。

4.適用機(jī)型的要求

如果試劑適用不同的機(jī)型，需要在不同機(jī)型上分別進(jìn)行分析性能評估。應(yīng)采用一個(gè)或多個(gè)機(jī)型，進(jìn)行充分的試劑分析性能建立研究，對于其他機(jī)型，應(yīng)分析各適用機(jī)型的工作原理、檢測方法、反應(yīng)條件控制、信號(hào)處理等，如基本相同，可基于風(fēng)險(xiǎn)分析對已建立的分析性能指標(biāo)進(jìn)行合理驗(yàn)證。所有適用機(jī)型驗(yàn)證的分析性能應(yīng)基本一致，如不同機(jī)型對某一檢測項(xiàng)目的某一分析性能存在差異，應(yīng)針對該差異采用不同機(jī)型進(jìn)行充分的分析性能建立研究。

5.包裝規(guī)格的要求

如試劑包含不同包裝規(guī)格，需對各包裝規(guī)格間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。如不同規(guī)格間存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行分析性能評估;如不同規(guī)格間不存在性能差異，需要詳細(xì)說明各規(guī)格間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規(guī)格進(jìn)行分析性能評估。

6.樣本要求

用于分析性能評估的樣本，應(yīng)盡量與預(yù)期適用的真實(shí)臨床樣本一致，并按照說明書描述的方式進(jìn)行樣本采集、處理、運(yùn)輸和保存。如特定濃度的樣本難以獲得，可采用不同濃度的樣本及陰性樣本進(jìn)行混合;如特定型別的樣本難以獲得，可合理采用標(biāo)準(zhǔn)菌株或毒株、臨床分離培養(yǎng)物等。

（二）分析性能評估項(xiàng)目的具體要求

定性檢測體外診斷試劑的分析性能評估一般包括適用的樣本類型、準(zhǔn)確度、精密度、空白限與檢出限、分析特異性、高劑量鉤狀效應(yīng)等。申請人應(yīng)設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)方案，對各項(xiàng)分析性能進(jìn)行充分評估。

1.適用的樣本類型

如果試劑適用于多種樣本類型（包括抗凝劑），應(yīng)采用合理方法評價(jià)每種樣本類型的適用性。對具有可比性的樣本類型，可選擇具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義數(shù)量的樣本進(jìn)行樣本一致性的同源比對研究;對于不具有可比性的樣本類型，應(yīng)對每種樣本類型分別進(jìn)行分析性能評估。此處所述可比樣本，一般指：性能指標(biāo)相同、陽性判斷值相同、預(yù)期人群一致、臨床意義相同。反之，則應(yīng)視為不可比樣本。

如果樣本的采集、處理方式存在差別，例如適用不同采樣器、不同樣本保存液、不同處理方法（如核酸的提取與純化、抗原修復(fù)條件等），應(yīng)分析這些差別的潛在影響，并進(jìn)行針對性的分析性能驗(yàn)證。

2.準(zhǔn)確度

申請人可選擇下述兩種方式或兩種方式之一進(jìn)行準(zhǔn)確度研究。

2.1方法學(xué)比對

采用申報(bào)試劑與診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)或已上市產(chǎn)品，同時(shí)檢測臨床樣本，比較檢測結(jié)果之間的一致性程度，進(jìn)行申報(bào)試劑的準(zhǔn)確度評價(jià)。

樣本應(yīng)選擇符合樣本穩(wěn)定性的預(yù)期人群樣本，或參考樣本盤。研究應(yīng)納入一定數(shù)量的陰性和陽性樣本，并注意包含一定數(shù)量的陽性判斷值附近的樣本和干擾樣本。

2.2參考品（盤）的檢測

通過檢測參考品（盤）分析申報(bào)產(chǎn)品檢測結(jié)果與經(jīng)確認(rèn)結(jié)果的符合情況，評價(jià)申報(bào)產(chǎn)品的準(zhǔn)確度。此處所述參考品（盤）指已經(jīng)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)/其他成熟方法檢測確認(rèn)過的，或有準(zhǔn)確臨床診斷信息的，由多份樣本組成的一套樣本。

應(yīng)注意參考品（盤）對各種常見型別/流行株的覆蓋和對所有檢測位點(diǎn)的覆蓋，包含不同來源、不同濃度水平的臨床樣本/臨床混合樣本和/或菌株/毒株。建議參考品（盤）還應(yīng)包含不含待測靶物質(zhì)的干擾及交叉樣本等。對于臨床罕見樣本可采用細(xì)胞系或人工制備的樣本作為參考品（盤）的組成，但應(yīng)注意樣本基質(zhì)與臨床樣本的一致性，提交人工制備的樣本與臨床真實(shí)樣本的一致性研究分析。

3.精密度

3.1重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性

精密度包括重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性。影響精密度的條件包括：操作者、測量儀器、測量程序、試劑批次（lot）、運(yùn)行（run）、時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件（實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等。

重復(fù)性指在重復(fù)性條件下的精密度，包括相同測量程序、相同操作者、相同測量系統(tǒng)、相同操作條件和相同地點(diǎn)，并且在短時(shí)間段內(nèi)對同一或相似被測對象重復(fù)測量。重復(fù)性條件代表基本不變的測量條件，此條件產(chǎn)生測量結(jié)果的變異最小。

再現(xiàn)性又稱實(shí)驗(yàn)室間精密度，指在包括了不同地點(diǎn)、不同操作者、不同測量系統(tǒng)的測量條件下對同一或相似被測對象重復(fù)測量的精密度，其中不同測量系統(tǒng)可使用不同測量程序。再現(xiàn)性條件代表最大改變的測量條件。

重復(fù)性和再現(xiàn)性是精密度的兩種極端情況，界于兩種極端情況之間的精密度，稱為中間精密度，指在包括相同的測量程序、相同地點(diǎn)的測量條件下對相同或相似的被測對象在一長時(shí)間段內(nèi)重復(fù)測量的精密度，可包含其他相關(guān)條件的改變，例如不同操作者、試劑批號(hào)等。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度考慮了體外診斷試劑在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用過程中的運(yùn)行、時(shí)間等影響因素，歸類為中間精密度的一種情況。

應(yīng)根據(jù)各測量條件對檢測結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評價(jià)，包括重復(fù)性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室間精密度和批間（lot-to-lot）精密度。

應(yīng)選擇包括最低檢出限水平、中強(qiáng)濃度水平、陰性的至少三個(gè)分析物濃度水平樣本進(jìn)行精密度研究。精密度研究可能涉及多天、多地點(diǎn)檢測，應(yīng)確保樣本的穩(wěn)定性和一致性，可將樣本等分保存。

建議選擇典型或臨床常見型別樣本進(jìn)行精密度研究。對于多項(xiàng)聯(lián)檢試劑產(chǎn)品，尤其是核酸和染色體檢測試劑，一般可根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計(jì)原理，每一反應(yīng)單元選擇易錯(cuò)或代表性樣本進(jìn)行研究。應(yīng)闡述研究位點(diǎn)選擇依據(jù)，明確樣本的來源、濃度和性質(zhì)確定方法。

3.2臨界值水平的精密度研究（如適用）

除上述精密度研究外，建議申請人對申報(bào)產(chǎn)品的臨界值進(jìn)行確定，并采用該濃度/水平樣本進(jìn)行精密度研究。此處所述臨界值水平不同于通過ROC曲線等方法確定的陽性判斷值。理想情況下，臨界值濃度水平，即為多次重復(fù)試驗(yàn)時(shí)，50%的結(jié)果為陰性，50%的結(jié)果為陽性濃度水平，在本文以C50表示。

建議采用C5～C95區(qū)間描述分析物濃度接近C50的樣本重復(fù)檢測的不精密度。

首先建立C50濃度，并通過對該濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，以對C50濃度進(jìn)行確認(rèn)。而后以各濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測的方式，判斷某一特定可接受范圍，如C50±20%，是否包含了C5～C95區(qū)間。如果-20%至+ 20%的濃度范圍包含了C5～C95區(qū)間，則可以認(rèn)為距離C50點(diǎn)達(dá)20%或以上的樣本可產(chǎn)生一致的結(jié)果; 即在C5～C95以外的樣本的結(jié)果是精密的，此時(shí)試劑精密度可接受。申請人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的結(jié)果接受標(biāo)準(zhǔn)，并詳述設(shè)定依據(jù)。一般可依據(jù)產(chǎn)品的臨床預(yù)期用途、方法學(xué)自身的準(zhǔn)確度、生物學(xué)變異、靶物質(zhì)的特性等設(shè)定產(chǎn)品的精密度可接受范圍。

申請人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的（單側(cè)或雙側(cè)）置信度水平，采用合理的統(tǒng)計(jì)方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。推薦對C50±20%兩個(gè)濃度水平分別重復(fù)進(jìn)行40次檢測，當(dāng)+20%濃度水平全部為陽性，-20%濃度水平全部為陰性時(shí)，得出-20%到+ 20%濃度范圍包含C5～C95區(qū)間的置信度＞80%。

4.檢出限和空白限

4.1檢出限

一般采用檢出限（Limit of Detection, LoD）指標(biāo)來體現(xiàn)注冊申報(bào)產(chǎn)品的檢出能力。檢出限的研究，應(yīng)采用多批試劑，多個(gè)樣本進(jìn)行，且研究應(yīng)持續(xù)多天。

可給出連續(xù)量值信號(hào)的定性檢測試劑，如基于酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的檢測試劑采用吸光度響應(yīng)區(qū)別“有反應(yīng)”和“無反應(yīng)”結(jié)果。對于此類檢測，可參考《定量檢測試劑分析性能評估注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》中相關(guān)內(nèi)容，設(shè)定空白限和LoD。注意：這不適用于臨界值遠(yuǎn)高于檢出限的檢出項(xiàng)目。

4.1.1LOD的建立

建議采用對已知分析物濃度的樣本進(jìn)行系列稀釋后重復(fù)檢測的方法，確定申報(bào)試劑的檢出限。在上述重復(fù)檢測過程中，記錄不同稀釋度/濃度檢出（或陽性）的結(jié)果。采用適當(dāng)?shù)哪Ｐ停ㄈ鏟robit分析）和分析方法，計(jì)算申報(bào)試劑在設(shè)定概率下的檢出限，一般在該檢測濃度下應(yīng)具有95%的陽性檢出率。

染色體檢測試劑，需要考慮不同嵌合比例的檢出情況（如適用）。

線粒體突變檢測試劑和腫瘤基因突變檢測試劑，應(yīng)考慮特定核酸濃度下，不同突變比例檢出情況下的LOD（如適用）。

病原體檢測試劑，應(yīng)納入代表性型別，分別計(jì)算每個(gè)型別的LoD，并取最大值作為整個(gè)檢測試劑的LOD，或分別聲稱不同型別的LOD。 對于罕見的型別，可在后續(xù)的檢出限驗(yàn)證試驗(yàn)中進(jìn)行確認(rèn)。

人類基因突變（胚系突變）或基因多態(tài)性檢測試劑，應(yīng)包含對型別為雜合子的樣本進(jìn)行LOD（核酸濃度）研究。

4.1.2LOD的驗(yàn)證

注冊申報(bào)產(chǎn)品應(yīng)在檢測限濃度水平對常見分析物型別進(jìn)行驗(yàn)證，一般采用對檢出限濃度水平樣本進(jìn)行至少20次的重復(fù)試驗(yàn)的方法對LOD進(jìn)行驗(yàn)證。申請人應(yīng)明確檢出限驗(yàn)證中，各個(gè)樣本的來源、型別及濃度確認(rèn)的方法信息。

4.2包容性（inclusivity）

對于病原體檢測試劑和部分人基因檢測試劑，應(yīng)證明申報(bào)試劑具有檢出不同型別待測病原體/不同基因型/不同基因突變位點(diǎn)的能力。包括中國人群已知常見基因型別/基因突變位點(diǎn)、病原體的亞群（組）和血清型。應(yīng)采用略高于檢出限濃度的各型別樣本進(jìn)行重復(fù)檢測研究。建議采用樣本為滅活的臨床樣本或標(biāo)準(zhǔn)菌株/毒株。對于罕見的型別可根據(jù)推薦度依次選用：假病毒（病原體檢測適用）、細(xì)胞株（人基因檢測適用）、人工克隆或合成的DNA或RNA或蛋白。應(yīng)提供各個(gè)研究樣本的來源、性質(zhì)確定方法及濃度等信息。

5.分析特異性

分析特異性受干擾和交叉反應(yīng)的影響。申請人應(yīng)分析待測樣本中及試劑使用過程中潛在的干擾物質(zhì)和交叉反應(yīng)，并對干擾和交叉的程度進(jìn)行量化。

5.1干擾試驗(yàn)

可采用添加干擾物質(zhì)的樣本進(jìn)行研究，如果干擾物質(zhì)的基質(zhì)與適用樣本不同，則添加量宜少于總體積的5%（溶解度允許條件下），并盡量使用接近體內(nèi)循環(huán)形式的樣品或純品。

干擾試驗(yàn)可采用如下方法：首先對可疑干擾物質(zhì)采用臨床樣本中的最高濃度（最差情形）進(jìn)行干擾篩查或驗(yàn)證，一般采用配對比對的方式，比較添加與未添加高濃度干擾物質(zhì)的樣本檢測結(jié)果的差異。如果差異超出接受范圍或?qū)εR床有顯著性影響，可確認(rèn)該物質(zhì)為干擾物質(zhì)，應(yīng)評估該干擾物質(zhì)濃度與干擾程度之間的關(guān)系;如果差異在接受范圍內(nèi)或?qū)εR床無顯著性影響，可認(rèn)為該濃度的物質(zhì)不產(chǎn)生干擾，應(yīng)明確不產(chǎn)生干擾的物質(zhì)濃度上限。

結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的結(jié)果接受標(biāo)準(zhǔn)，并詳述設(shè)定依據(jù)。對于可給出量值數(shù)據(jù)或計(jì)數(shù)結(jié)果的定性檢測試劑，如OD值、Ct值，一般可依據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途、生物學(xué)變異等設(shè)定產(chǎn)品的可接受標(biāo)準(zhǔn)。

在對可疑干擾物質(zhì)進(jìn)行干擾篩查或驗(yàn)證時(shí)，建議采用包含弱陽性水平在內(nèi)，至少兩個(gè)分析物水平的樣本。在評估干擾物質(zhì)濃度與干擾程度之間關(guān)系時(shí)，可適當(dāng)增加樣本數(shù)量，納入更多分析物水平的樣本。

申請人除按照上述方法采用添加干擾物的樣本進(jìn)行研究外，亦可采用有代表性的患者樣本，通過對申報(bào)產(chǎn)品與不受該干擾物影響的測量方法檢測結(jié)果進(jìn)行對比，進(jìn)行干擾物質(zhì)研究。

常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)包括血紅蛋白、脂類、膽紅素、白細(xì)胞裂解物、自身抗體、異嗜性抗體、疾病相關(guān)蛋白、患者體內(nèi)的異常生化代謝物等;常見的外源性干擾物質(zhì)包括樣本添加劑（抗凝劑或防腐劑）、常用藥物及其代謝物、患者群體使用的藥物及其代謝物、膳食物質(zhì)、樣本收集或處理過程中接觸到的物質(zhì)，樣本污染物;亦應(yīng)考慮文獻(xiàn)中已報(bào)道的對類似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)。申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)選擇潛在的干擾物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。

5.2交叉反應(yīng)

5.2.1常見交叉反應(yīng)物質(zhì)

包括分析物的結(jié)構(gòu)類似物、具有同源性序列的核酸片段、檢測范圍外的型別，易共存的其他類似物、易引起相同或相似的臨床癥狀的其他病原體、相同或相似的臨床癥狀出現(xiàn)時(shí)，體內(nèi)易升高的其他蛋白、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物（包含近緣微生物），已報(bào)道對類似試劑或測量程序存在交叉的物質(zhì)等。

還應(yīng)考慮到由于產(chǎn)品原材料設(shè)計(jì)可能引入的交叉反應(yīng)。如病原體抗體檢測試劑采用基因重組抗原，應(yīng)增加對異源物質(zhì)，如重組基因及表達(dá)宿主的特異性抗體的交叉反應(yīng)評價(jià)。

5.2.2研究方法

企業(yè)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)選擇潛在的交叉反應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。建議選擇高濃度交叉反應(yīng)物水平進(jìn)行驗(yàn)證，細(xì)菌或者真菌的最低濃度為106CFU/mL;病毒的最低濃度為105PFU/mL;人野生型DNA至少包含100 ng/μL野生核酸樣本。對于交叉反應(yīng)中病原體的最低濃度，生產(chǎn)商也可根據(jù)病原體的具體特性規(guī)定相應(yīng)濃度及濃度單位。應(yīng)提供用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病原體的制備方法、來源、種屬和濃度信息。

對于核酸檢測試劑，當(dāng)遇交叉反應(yīng)物難以獲得，如病原體難以培養(yǎng)或基因型頻率低時(shí)，可采用核酸樣本進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗(yàn)證。此時(shí)應(yīng)將核酸樣本視為實(shí)際使用過程中參與檢測反應(yīng)的核酸樣本，根據(jù)說明書的要求配制反應(yīng)體系，進(jìn)行檢測。

對于血清學(xué)檢測試劑，用于交叉反應(yīng)研究的抗體類型應(yīng)與待測目的的抗體類型相同，如檢測病原病原體特異性IgG抗體，應(yīng)研究與其他相關(guān)病原體特異性IgG抗體的交叉反應(yīng)。

6.高劑量鉤狀效應(yīng)

對于部分免疫學(xué)原理的產(chǎn)品，檢測含有極高濃度的待測抗體/抗原的樣本時(shí)，飽和反應(yīng)可能導(dǎo)致檢測濃度值低于真實(shí)值或出現(xiàn)假陰性結(jié)果。建議對多個(gè)含有高濃度分析物的樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度檢測，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)多份進(jìn)行檢測，明確不產(chǎn)生鉤狀效應(yīng)的最高分析物濃度。

7.診斷靈敏度

對于預(yù)期用途為病原體感染輔助診斷的檢測試劑，如有經(jīng)全面驗(yàn)證的轉(zhuǎn)換盤，建議額外采用轉(zhuǎn)換盤進(jìn)行診斷靈敏度的研究。比較與同類已上市產(chǎn)品的診斷靈敏度差異。

8.其他

8.1核酸提取

對于核酸檢測試劑，不同的核酸提取方法直接影響待測核酸的質(zhì)量與濃度水平，此類試劑應(yīng)進(jìn)行核酸提取性能研究。申請人可通過對比不同提取方法的提取純度、濃度、提取效率和精密度，選擇申報(bào)產(chǎn)品配套使用的核酸提取方法/試劑。

若注冊申報(bào)試劑聲稱適用兩種或以上核酸提取方法/試劑，則應(yīng)對選定的每一種核酸提取方法的檢測試劑性能進(jìn)行驗(yàn)證，一般而言，應(yīng)至少包含對LoD和精密度的驗(yàn)證，此處精密度應(yīng)參考本文此前關(guān)于再現(xiàn)性的研究要求。

8.2免疫反應(yīng)性

對于免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測試劑，應(yīng)提交試劑對正常人體組織和非正常組織，每種組織類型不少于3例的免疫反應(yīng)性研究。評價(jià)陰、陽性表達(dá)情況并描述著色位置及染色特點(diǎn)。一般而言，非正常組織包括：相關(guān)良性、惡性病變組織和經(jīng)文獻(xiàn)報(bào)道可能出現(xiàn)陽性表達(dá)的惡性病變組織。

8.3基于原位雜交方法的檢測試劑的其他性能評估

一般應(yīng)進(jìn)行雜交效率以及探針特異性的研究。

雜交效率用于評價(jià)申報(bào)產(chǎn)品探針結(jié)合靶序列的能力。該研究建議使用中期分裂相的外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行涂片分析。雜交效率的研究應(yīng)考慮不同判讀者差異的影響。對于檢測特定腫瘤細(xì)胞中目標(biāo)序列的檢測試劑，還應(yīng)選擇相關(guān)腫瘤組織樣本進(jìn)行雜交效率的研究。

探針特異性通過特異雜交到染色體正確位置的雜交信號(hào)占全部雜交信號(hào)的比例來表示。該研究建議使用中期分裂相的外周血淋巴細(xì)胞涂片分析，選擇來源于不同人體的細(xì)胞，對至少200個(gè)靶位點(diǎn)進(jìn)行分析計(jì)數(shù)，研究應(yīng)結(jié)合顯帶技術(shù)進(jìn)行觀察。同時(shí)如果研究出現(xiàn)交叉雜交，應(yīng)考慮靶序列與交叉雜交序列的同源性程度，是否存在其他相似染色體異常類型等問題。

建議該類產(chǎn)品分析性能評估參照相應(yīng)的審查指導(dǎo)原則進(jìn)行。

本文件主要介紹定性檢測體外診斷試劑常見的分析性能根據(jù)產(chǎn)品特性，可能還需研究其他分析性能，暫不在本文敘述。

（三）分析性能評估申報(bào)資料的要求

申請人應(yīng)提交體外診斷試劑產(chǎn)品的分析性能評估資料，對于每項(xiàng)性能均應(yīng)明確具體研究目的、試驗(yàn)方法、原始數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析過程及結(jié)果。相關(guān)基本信息也應(yīng)在申報(bào)資料中進(jìn)行描述，包括試驗(yàn)地點(diǎn)，試驗(yàn)采用的具體試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的名稱、規(guī)格和批號(hào)，儀器名稱和型號(hào)，樣本類型、來源、處理方法、基質(zhì)類型及所含物質(zhì)信息等。

分析性能評估的結(jié)論應(yīng)在產(chǎn)品說明書中進(jìn)行描述，綜合不同試劑規(guī)格、批次及適用機(jī)型的試驗(yàn)結(jié)果，合理描述產(chǎn)品的分析性能。

三、名詞解釋

1.準(zhǔn)確度：被分析物質(zhì)的測定結(jié)果與真實(shí)結(jié)果之間的接近程度。

2.陽性判斷值（cut-off value）：用于鑒別樣品，作為判斷特定疾病、狀態(tài)或被測物存在或不存在的界限的量值。對于定性試驗(yàn)，高于此閾值的結(jié)果報(bào)告為陽性，而低于此閾值的結(jié)果報(bào)告為陰性。

3. C50（50%濃度）:接近臨界值的分析物濃度，多次重復(fù)檢測此濃度的單一樣本時(shí)將獲得50%的陽性結(jié)果和50%的陰性結(jié)果。

4. C5～C95區(qū)間：臨界值附近的分析物濃度，可認(rèn)為此濃度區(qū)間之外的分析物檢測結(jié)果始終為陰性（濃度

5. 診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)：使用一種方法或聯(lián)合多種方法，包括實(shí)驗(yàn)室檢測、影像學(xué)檢測、病理和隨訪信息在內(nèi)的臨床信息，來界定狀況、事件和關(guān)注特征有無的標(biāo)準(zhǔn)。

6. 檢出限（Limit of Detection，LOD）：由給定測量程序得到的測得量值，對于此值，在給定聲稱物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α?xí)r，聲稱不存在該成分的誤判概率為β。

注1:對于分子測量程序，指持續(xù)檢出的最低分析物濃度。（通常是指常規(guī)臨床實(shí)驗(yàn)室條件下，特定樣本類型＞95%檢出率。）

7.包容性（inclusivity）：指檢測試劑可以對預(yù)期范圍內(nèi)的靶物質(zhì)（如基因型/位點(diǎn)等）及其狀態(tài)的檢出能力。

8.高劑量鉤狀效應(yīng)：是指在免疫化學(xué)測量程序中由相對抗體濃度抗原濃度過量或相對抗原濃度抗體濃度過量時(shí)的抗原-抗體免疫復(fù)合物減少而引起的負(fù)偏倚。

9.測量程序：按照一個(gè)或多個(gè)測量原理和給定的測量方法，基于一種測量模型，對測量所作的詳細(xì)描述，包括獲得測量結(jié)果所必需的任何計(jì)算。

四、參考文獻(xiàn)

[1] GB/T 29791.1-2013，體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）第1部分：術(shù)語、定義和通用要求[S].

[2] WS/T 505-2017, 定性測定性能評價(jià)指南[S].

[3] CLSI. User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance. Approved Guideline—Second Edition. CLSI document EP12-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.

[4] CLSI. Evaluation of Detection Capability for Clinical Laboratory Measurement Procedures; Approved Guideline—Second Edition. CLSI document EP17-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2012.

[5] CLSI. Evaluation of Precision of Quantitative Measurement Procedures; Approved Guideline—Third Edition. CLSI document EP05-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2014.

[6] CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry. 3rd ed. CLSI guideline EP07. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2018.

[7] CLSI. Supplemental Tables for Interference Testing in Clinical Chemistry. 1st ed. CLSI guideline EP37. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2018.